Mestrado em Biotecnologia

• LUIZ FILIPE RAMALHO NUNES DE MORAES

• Ludovico Migliolo

A necessidade de descobrir novos compostos que possam atuar seletivamente sobre patógenos está se tornando cada vez mais evidente, dado o número de mortes em todo o mundo devido a infecções bacterianas ou células tumorais. Novas ferramentas biotecnológicas multifuncionais estão sendo buscadas, incluindo compostos presentes em aranhas venenosas, que possuem alto potencial biotecnológico. O presente trabalho tem como objetivo realizar o racional design e avaliação funcional de peptídeos sintéticos derivados da aranha Lachesana tarabaevi toxina, conhecida como latarcina-3a. A atividade antimicrobiana foi testada contra bactérias Gram-negativas e -positivas, com concentrações inibitórias mínimas (MIC) entre 4 a 128 µg.mL-1 . Ensaios anti-biofilme foram realizados para obter MBIC demonstrando atividade nas concentrações de 4 a 128 µg.mL-1 .

• ALEXYA SANDIM GUINDO

• Ludovico Migliolo

Nos últimos anos, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) isolados de toxinas de anuros vem ganhando cada vez mais atenção como novos candidatos a medicamentos antimicrobianos para o combate a infecções causadas por bactérias, biofilmes bacterianos, fungos, e células tumorais. Neste trabalho, o objetivo foi desenhar racionalmente um novo peptídeo a partir da temporina-PTa. Para a construção do peptídeo análogo, as características físico-químicas foram reorganizadas em resíduos hidrofílicos e hidrofóbicos com adição de lisinas e leucinas. Assim, as atividades biológicas de concentração inibitória mínima (MICs) foi de 2,7 a 43,3 µM contra o crescimento de bactérias Gram-negativas e -positivas. Testes em diferentes espécies de leveduras do gênero Candida spp. os MICs variaram de 5,4 a 86,6 µM sendo seu melhor desempenho frente a C. auris. ...

• PEDRO HENRIQUE DE OLIVEIRA CARDOSO

• Ludovico Migliolo

Infecções nosocomiais são um problema mundial que causam mortes e complicações, além de custos elevados. Um dos motivos são bactérias patogênicas a humanos que resiste aos tratamentos convencionais com múltiplas respostas imunes, como inflamação devido à libertação de endotoxinas como o lipopolisacarídeo. Uma resposta imune descontrolada pode levar a doenças neurodegenerativas, como Alzheimer e Parkinson. Os peptídeos antimicrobianos surgem como possível solução para este problema, peptídeos de fungos que competem com bactérias patogênicas a humanos por nichos ecológicos são desejáveis. Diante do exposto, nesse trabalho foi avaliado o peptídeo Candida albicans Multiactivity Peptide 1 (Ca-MAP1), bioinspirado na toxina citolítica candidalisina, derivada do fungo Candida albicans, com objetivo de desenvolver um peptídeo com menor porcentagem de hemólise do que a candidalisina, com atividade antibacteriana, anti-inflamatória e citotóxica contra células tumorais. 

• SANY CAROLINE LIBERAL

O monitoramento do parasitismo na fauna silvestre é importante para o entendimento do papel epidemiológico das espécies de vida livre no sistema reservatório de parasitas zoonóticos, podendo constituir uma ferramenta essencial na prevenção de doenças infecciosas. Visto que as relações parasita-hospedeiro nos ecótopos silvestres são constantemente modificadas por diferentes fatores bióticos e abióticos e que os estudos dessas relações nos animais na natureza são largamente negligenciados, objetivou-se avaliar a influência de variáveis bióticas na detecção de Trypanosoma spp. em Thrichomys fosteri no Pantanal Sul-Mato-Grossense. A coleta de material biológico ocorreu entre 2019 e 2020. Os animais amostrados foram pesados, medidos e sexados e calculou-se a condição corporal a partir da regressão linear entre peso e comprimento dos indivíduos amostrados. A detecção de Trypanosoma spp. foi realizada por nPCR de DNA extraído de coágulo sanguíneo utilizando-se como alvo a subunidade menor do gene ribossomal (18s SSU rDNA). As análises estatísticas foram realizadas por Modelos Lineares Generalizados. O melhor modelo avaliado foi o que selecionou a condição corporal como variável explicativa, indicando que a condição corporal estaria influenciando positivamente a detecção. Como a parasitemia é uma condição necessária a transmissão vetorial, T. fosteri parece ser uma espécie importante na manutenção de ciclos de transmissão de Trypanosoma spp. na região do Pantanal. Ainda, T. fosteri é extremamente abundante na região estudada e constitui presa para diferentes espécies de carnívoros silvestres, desse modo a transmissão através da predação (rede trófica) também estaria sendo assegurada.
Palavras-chave: Tripanossomatídeos; Pequenos Mamíferos; Parasitismo.

• CAROLINE PAES DOS SANTOS

• Carina Elisei de Oliveira

A brucelose é uma doença infecciosa de grande importância para a saúde pública e a produção animal mundial. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade imunomoduladora de um posbiótico em bezerras Nelore imunizadas com a cepa vacinal B19. Para isso, 40 bezerras soronegativas e com ausência de DNA de Brucella spp. circulantes foram submetidas a quatro tratamentos: InRum (Ingulbal Ruminant®); InPro (Ingulbal Protein®); RumPro (Ingulbal Ruminant® e Ingulbal Protein®); e controle. As coletas de material biológico foram realizadas no início do tratamento (T0) e aos 15 (T1), 45 (T2), 75 (T3) e 105 (T4) dias. Em T1, a suplementação com posbiótico foi suspensa e todos os animais receberam a vacina obrigatória B19. Para avaliação da resposta celular, as médias de glóbulos brancos, linfócitos, monócitos e neutrófilos foram determinados. Um teste I-ELISA baseado em antígeno solúvel de B. abortus S2308 foi desenvolvido para determinar os níveis de IgG total. InRum apresentou aumento significativo na contagem de linfócitos após 45 dias de tratamento; entretanto, o estímulo na produção de IgG foi significativo apenas em 15 dias do início do tratamento. O grupo InPro apresentou proliferação significativa de linfócitos nos dias 45 e 75, aumento de neutrófilos nos 105 dias e alta produção de níveis de IgG durante todo o período após T1. RumPro resultou em estímulo significativo na produção de anticorpos a partir de 75 dias após o início do tratamento e permaneceu até o final do experimento. Nossos resultados sugerem que a suplementação com posbiótico é uma alternativa promissora para modular a resposta imune celular e humoral quando associado com a vacina B19 contra a brucelose bovina.
Palavras-chave: antígeno solúvel, bezerras, imunidade celular, imunidade humoral, I-ELISA.

• JOELMA PATRICIA ROSSETTO

As infecções bacterianas resistentes são consideradas um problema de
saúde pública a nível global. Diante desta problemática, surge a necessidade de
desenvolver novas alternativas para o combate de microrganismos resistentes.
Frente a esta condição citamos o interesse no estudo de peptídeos
antimicrobianos (PAMs) otimizados pela sua seletividade celular, potencial
antibacteriano e baixa toxicidade ao hospedeiro. Dentre as estratégias de
melhoramento de PAMs, podemos citar o desenho computacional automatizado
através da inserção de padrões antimicrobianos em sequências não
antimicrobianas. No presente estudo, três peptídeos desenhados
computacionalmente (PcDBS1R1, R5 e R9) através do algoritmo Joker e
derivados de um fragmento de uma proteína hipotétic de Plasmodium chibaudi
foram, pela primeira vez, caracterizados estruturalmente e biologicamente.
Análises de dicroísmo circular (DC) e ressonância magnética nuclear (RMN)
revelaram que há diferenças estruturais significativa entre estes peptídeos, com
uma maior plasticidade estrutural para PcDBS1R1. Contudo, tais diferenças não
foram correlacionadas à função antimicrobiana. PcDBSS1R1 e R5 inibiram e
erradicaram cepas de Escherichia coli (ATCC 25922) na concentração de 32
μmol L-1, enquanto que o peptídeo PcDBS1R9 foi bactericida a 64 μmol L-1. Nos
experimentos frente a cepa de E. coli (KpC+, resistente), observamos atividade
bacteriostática e bactericida dos peptídeos na concentração de 64 μmol L-1, com
exceção da atividade bactericida do peptídeo PcDBS1R9, a qual não foi
determinada. Esta observação, contudo, muda quando avaliamos o efeito
hemolítico dos peptídeos, mostrando que o peptídeo PcDBS1R9 apresentou
baixo percentual de hemólise em todas as concentrações testadas, quando
comparado às outras duas variantes. Em suma, os resultados obtidos neste
estudo demonstram que os peptídeos apresentaram semelhante atividade
antimicrobiana, apesar dos perfis estruturais distintos, em termos de estrutura
secundária e flexibilidade/rigidez e tem promissor potencial para serem
explorados para o controle de infecções bacterianas.
Palavras-chave: Infecções bacterianas, PAMs desenhados
computacionalmente, Escherichia coli.

• RODRIGO BARBOSA DE MIRANDA

Este trabalho visou apresentar um protocolo de biossegurança para a realização segura das atividades esportivas de participação e lazer durante a fase de isolamento social causada pela COVID-19, bem como após esse período, até que seja possível o efetivo controle do vírus por meio da vacinação da população, Em virtude na demanda da população para realização de práticas esportivas, como atividade recreativa ou como necessidade de saúde, esse trabalho propôs delinear condutas específicas para realização de diferentes manifestações esportivas de participação e de lazer (social, esportivo e recreativo), utilizando para tal, subsídios, recomendações, práticas e demais orientações indicadas pela Organização Mundial de Saúde - OMS em apoio às medidas restritivas adotadas e comuns aos diferentes países. Assim como em diversos lugares especificamente ligados aos esportes, como Universidades, Instituições esportivas, dentre outros, desenvolveram seus próprios protocolos de segurança e saúde para conseguir que não houvesse a maior disseminação do vírus, a materialidade fim desta dissertação foi um protocolo de biossegurança para a prática de atividade física e de lazer no Mato Grosso do Sul. Como objetivo principal deste trabalho, buscou-se delinear condutas específicas, a partir de protocolos de biossegurança, para realização de diferentes manifestações esportivas de participação e de lazer (social, esportivo e recreativo), necessárias diante do contexto atual de enfrentamento à situação provocada pela circulação do COVID-19. Primeiramente o trabalho usou de metodologias transversais descritivas sob a forma de revisão integrativa da literatura, para que assim fosse possível selecionar as amostras dos artigos que tinham o tema principal desta dissertação. Os resultados apontam para uma necessidade de devidos cuidados com protocolo de biossegurança para que o contágio do COVID-19 não seja ainda maior e suas complicações também. Ao que concerne as produções científicas que versam sobre o tema de protocolos de biossegurança para as atividades físicas e de lazer, salienta-se que há escassez, o que interfere diretamente nas discussões e, antagonicamente, o que valoriza e demonstra a importância do tema aqui apresentado.
Palavras-chave: Biossegurança; Atividade Física; Corrida; COVID-19

• SAMILLA BEATRIZ DE REZENDE

Os peptídeos antimicrobianos (PAMs) têm sido destacados como uma alternativa a
antibioticoterapia convencional. Contudo, alguns obstáculos ainda devem ser
ultrapassados para que os PAMs sejam administrados a nível clínico, incluindo sua
rápida eliminação e degradação proteolítica. A otimização de PAMs através da
incorporação de D-aminoácidos (D-aa) em sequências L-aminoácidos (L-aa) pode gerar
peptídeos diastereoisômeros com maior resistência a proteases, sendo uma estratégia
para superar as limitações dos PAMs em um contexto clínico. Assim, o objetivo deste
trabalho consistiu em avaliar a influência de D-Argininas (D-Arg) e D-Lisinas (D-Lis)
em três peptídeos antimicrobianos desenhados computacionalmente, denominados
PaDBS1R2, R6 e R7. Dois grupos de peptídeos foram utilizados, incluindo um grupo
parental L-aa (Grupo I) e um grupo contendo todos os resíduos de arginina e lisina em
sua orientação D-aa (grupo II, diastereoisômeros). Todos os peptídeos foram
sintetizados e submetidos à testes de estabilidade em soro proveniente de plasma
humano. Ademais, foram realizados ensaios contra cepas susceptíveis e resistentes.
Ensaios hemolíticos e citotóxicos utilizando células de mamíferos saudáveis também
foram realizados. A avaliação estrutural de ambos os grupos foi realizada através de
experimentos de dicroísmo circular (DC) e ressonância magnética nuclear (RMN). Nos
ensaios de estabilidade, após 60 min de incubação com soro humano, os peptídeos do
Grupo II apresentaram maior resistência a proteólise (>55%) quando comparados ao
Grupo I (0%). Contudo, do ponto de vista de atividades biológicas, apenas os peptídeos
do Grupo I apresentaram amplo espectro de atividade antibacteriana de 32 a 2 μmoL-1,
enquanto os peptídeos diastereoisômeros tiveram suas atividades drasticamente
comprometidas. Para ambos os grupos, não foram observadas atividades hemolíticas ou
citotóxicas até 100 mol L-1. As análises estruturais revelaram que o Grupo I adotou
estrutura de -hélice em 2,2,2-trifluoroetanol (TFE) 30% (v/v) e em micelas de dodecil
sulfato de sódio (SDS). No entanto, o Grupo II perdeu completamente sua estrutura
secundária. Em suma, a inversão de quiralidade proporcionou uma maior estabilidade
em plasma nos peptídeos do Grupo II a custo da perda estrutural que, por consequência,
ocasionou na depleção da atividade dos peptídeos. Dessa forma, estudos futuros são
encorajados para não só avaliar a influência, mas modular a inserção de D-Arg e D-Lis
nas sequências alvo para otimização da estrutura-função em peptídeo diastereoisômeros.
Palavras chave: peptídeos antimicrobianos, D-aminoácidos, peptídeos
diastereoisômeros, resistência bacteriana

• ANNY GABRIELLY ACOSTA DA SILVA

O aumento da resistência de cepas bacterianas aos antibióticos disponíveis e o decréscimo contínuo no número de novos antimicrobianos gera uma constante busca por novos compostos, pois essa problemática vem sendo mostrada cada vez mais como um desafio para a saúde pública mundial. Neste contexto, decorre a necessidade de desenvolver novas estratégias para o tratamento e profilaxia de doenças infecciosas. Os óleos essenciais (OE) vêm ganhando espaço nesta busca por novos antimicrobianos. Schinus terebinthifolia, Psidium guajava e Hymenaea courbaril são plantas que se destacam em função de propriedade biológicas terapêuticas e também no uso da medicina popular. Avaliação e estudo das propriedades biológicas se faz necessário para a compreensão e validação da sua eficácia clinica. Portanto, o presente estudo avaliou a atividade antibacteriana e hemolítica dos OE de S. terebinthifolia, P. guajava e H. courbaril. A extração do OE destas plantas foi feito por método de hidrodestilação e se obteve o rendimento de 0,70%; 0,34% e 0,70% para S. terebinthifolia, P. guajava e H. courbaril, respectivamente. A atividade antibacteriana de OE S. terebinthifolia, P.guajava e H. courbaril foi avaliado por meio de microdiluição em caldo com Concentração Inibitória Mínima (CIM) Concentração Inibitória Mínima de Biofilme (CIMB) e frente cepas de Staphyloccocus aureus, Escherichia coli e Escherichia coli KPC+. A toxicidade do OE foi analisada por ensaio hemolítico. O OE S. terebinthifolia demonstrou potencial antibacteriano para E. coli KPC+. Na proporção de 1:100 P. guajava para S. aureus na proporção de 1:200 e 1:400 e H. courbaril para S. aureus na proporção 1:200 e 1:400. Para a formação de biofilme foi observado inibição de crescimento no OE de S. terebinthifolia 80% para E. coli KPC+; P. guajava 50% para E. coli KPC+ e E. coli e H. courbaril 30% para E. coli KPC+. Com exceção de S. terebinthifolia na proporção de 1:1600 de diluição, todos os OE em todas as amostras apresentaram hemólise acima de 50%, sendo considerado um risco tóxico para a membrana das hemácias. Estes resultados impulsiona a realização de outros estudos para a verificação da eficácia e utilização de outros métodos.
Palavras-chave: Óleo essencial; aroeira-vermelha; goiaba; jatobá potencial antimicrobiano.

• GIOVANNA DE PINHO PIERI

A insuficiência venosa é uma doença associada a membros inferiores que causa feridas. Vários fatores podem influenciar no processo de cicatrização tornando-as crônicas, tal como infiltração bacteriana. Portanto, o objetivo do presente trabalho foi determinar o perfil microbiológico das feridas venosas crônicas de pacientes atendidos no centro de referência de tratamento de lesões. A metodologia utilizada foi descritiva com abordagem quantitativa realizada por meio da coleta de material biológico de feridas venosas crônicas de pacientes atendidos no Centro de Especialidades Médicas – CEM, referência em tratamento de lesões periféricas da rede municipal de Saúde de Campo Grande-MS, empregando a técnica de Levine e também o sistema automatizado Vitek® para a identificação dos isolados. Foram entrevistados 20 pacientes totalizando 26 feridas, no qual foram obtidas 15 espécies bacterianas totalizando 45 isolados. Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa foram as espécies mais prevalentes no estudo totalizando 44,4% de todos os isolados. Em relação ao perfil de suscetibilidade bacteriana, 57,8% (N=26) se mostraram resistentes aos antimicrobianos testados, sendo 2 cepas multirresistentes. No geral Gram-positivas e -negativas se mostraram em sua maioria resistentes ao grupo dos antibióticos β-lactâmicos. Por fim, foi concluído que o rastreamento dos perfis de suscetibilidade microbiana nos pacientes portadores de feridas crônicas é essencial para a escolha da antibioticoterapia correta, levando a um processo cicatricial no tempo adequado e por consequência redução de custos durante o tratamento para o sistema de saúde pública e privada.
Palavras chave: Bactérias multirresistentes Etiologia venosa, Teste de suscetibilidade antimicrobiana, β-lactâmicos

• BRUNA KUHN DE FREITAS SILVA

Aproximadamente 70 % dos diagnósticos médicos são baseados nos resultados obtidos com o auxílio da medicina laboratorial. Os apps com a temática laboratorial são basicamente focados em fornecer valores de referência e preparo para os exames. Em virtude da carência dos dispositivos presentes no mercado, a criação de um aplicativo capaz de fornecer informações diversificadas, alertando os laboratoristas sobre a capacidade de interferência dos fármacos nos testes laboratoriais se faz necessária. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um aplicativo para dispositivos móveis capaz de apresentar os dados sobre os principais exames laboratoriais e os interferentes de origem farmacológica. O aplicativo foi desenvolvido no portal de construção de aplicativos, conhecido como Fabrica de aplicativos (FabApp) e os conteúdos que fazem parte do mesmo foram selecionados utilizando as pesquisas originais, revisões de literatura (sistemática, integrativa ou narrativa) e relatos de experiência publicados entre janeiro de 2010 a agosto de 2020, em língua inglesa, portuguesa ou espanhola; disponíveis na íntegra e que apresentassem especificamente, exames de laboratório, interferentes de origem farmacológica e o princípio ativo ou classe farmacêutica correspondente. O aplicativo conta com um banco de dados com mais de 50 classes terapêuticas, 100 princípios ativos capazes de causar divergência nos resultados dos testes laboratoriais, mais de 1000 denominações comerciais para esses princípios ativos, além uma ficha informativa sobre as características de cada classe de medicamento citado. Municiar biomédicos, farmacêuticos, médicos e demais profissionais atuantes em laboratórios clínicos com aplicativos específicos focados na minimização de erros, agilizando os processos e garantindo que as informações são seguras, pode gerar um grande impacto na medicina laboratorial, trazendo segurança para toda a rede que usufrui destes serviços.
PALAVRAS-CHAVE: fármacos, diagnóstico laboratorial, interferentes, testagens de laboratório clinico, aplicativos

• PATRÍCIA SOUZA E SILVA

Dos novos fármacos que chegaram ao mercado, apenas 3,1%, tinham como alvo doenças tropicais negligenciadas (DNTs), por exemplo Doença de Chagas. Assim como as DNTs as infecções nosocomiais são um problema mundial com medicamentos antibacterianos cada vez mais ineficientes levando a resistência e formação de biofilmes cada vez mais comuns nos ambientes hospitalares. Diante deste panorama, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) sintéticos bioinspirados em toxinas têm apresentado potencial para se tornarem alternativas para essa problemática. Os PAMs podem ser encontrados praticamente em todos os reinos desde bactérias a vertebrados. Em anuros, na secreção cutânea já foram descritas e caracterizadas diversas moléculas antimicrobianas, como por exemplo a temporina PTa. Portanto, este trabalho propõe a avaliação de peptídeos análogos a temporina-PTa de Hylarana picturata contra protozoário Tripasoma cruzi e bactérias resistentes, formadoras de biofilme. A metodologia usada no trabalho foi o planejamento racional com base na temporina-PTa (controle) mantendo 70% das características físico-químicas. Após a síntese do controle e análogos foi realizada a quantificação por meio de absorbância. As análises in vitro sobre o efeito antiprozoa foram realizadas frente as formas epimastigota e tripomastigoata em cultura. Já os testes para determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração bactericida mínima (CBM), concentração inibitória mínima do biofilme (CIMB) e a hemolítica foram realizadas em meio Muller Hinton. Além disso, em adição, estudos in silico de modelagem e dinâmica molecular foram realizados frente as membranas miméticas biológicas Gram-negativa e -positiva. sequências análogas foi a substituição pontual de resíduos de aminoácidos no peptídeo parental com a intenção de aumentar a carga líquida total, ajustar a hidrofobicidade, anfipacidade e reorganizar o momento hidrofóbico mantendo 69% e 77% da característica original. O parental temporina-PTa e os seus análogos temphylarata-1 e temphylarta-2 foram tóxicos para as células do T.cruzi na forma tripomastigota com atividade chegando a 84, 48 e 83 %. O peptídeo parental temporina-PTa eliminou as celulas bacterianas na concentração mínima de 43,4 μM. Os análogos O temphylarata-1 e temphylarata-2 eliminaram em 99,9 % as células bacterianas testadas nas concentrações 3 a 23 μM. A temporina-PTa não apresentou atividade significativa contra a interrupção da formação de biofilme, os análogos interromperam o biofilme nas concentrações 92 a 43,6 μM. Os peptídeos temporina-PTa, temphylarata-1 e temphylarata-2 não foram hemolíticos e nem tóxicos para células Vero. Em in silico os peptídeos parentais perdem sua conformação em água, em contrapartida os análogos permanecem com a conformação helicoidal. Frente a interação peptídeo-membrana temporina-PTa atração entre 2,7 a 3 Å, temphylarata-1 com atrações variando em 2,6 a 3,2 Å e temphylarata-2 de 2,6 a 3,4 Å. Por fim, os peptídeos se mostraram excelentes candidatos para o desenvolvimento de produtos biotecnológicos para combater patógenos.
Palavras-chave: Bactérias patogênicas; Desenho racional; Peptídeos antimicrobianos; Estudo in silico.

• REGIANE FURTADO DE MIRANDA

A antracnose é uma das principais doenças de pós-colheita em cultura do mamão no Brasil, doença causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides com relatados de perdas de até 40% na produção nacional. A prevenção da antracnose é realizada pelo tratamento preventivo com fungicidas e na conservação em pós colheita o tratamento térmico ou por biofilmes. Esse trabalho tem como objetivo avaliar o potencial de isolados de Trichoderma spp., no controle biológico de C. gloeosporioides. Fungos do gênero Trichoderma são conhecidos pelo seu potencial como agentes de controle biológico dos mais diversos fitopatógenos. Os mecanismos de ação destes fungos envolvem a competição por nutrientes e espaço, micoparasitismo, produção de metabolitos voláteis e não voláteis e pela produção de enzimas hidrolíticas. No teste de pareamento os isolados CS101, AMA104, TC10 e AB103 apresentaram uma alta inibição do crescimento micelial do fitopatógeno. O isolado AB103 apresentou o maior halo de inibição no teste de metabolitos voláteis quando comparado com os demais isolados. Nos testes de metabolitos não voláteis foram utilizadas amostras de sobrenadante de cultura filtradas ou autoclavadas, denominadas de metabólitos não voláteis (MNV) e metabólitos não voláteis termoestáveis (MNVT), respectivamente. Todos os isolados produziram metabólitos MNV e MNVT quando crescidos em meio caldo BD. Entretanto, o isolado T29 apresentou a maior inibição de crescimento micelial do fitopatógeno em ambas condições analisadas (MNV e MNVT). Em meio caldo BD contendo micélio macerado de C. gloeosporioides (BDMCG) como fonte de N e C, o isolado T29 apresentou a maior inibição de crescimento micelial do fitopatógeno em ambas condições (MNV e MNVT). A atividade das enzimas hidrolíticas relacionadas com o micoparasitismo foram determinadas no sobrenadante de cultura dos isolados crescidos no meio BDMCG. O isolado CS101 foi o melhor produtor da quitinase e N-acetilglicosaminidase. A melhor produção de β-1,3-glucanase foi observado nos isolados AM104, B201 e ALL42. Os isolados ALL42 e T00 foram os maiores produtores de fosfatase ácida e protease, respectivamente. A relação entre a teste de pareamento, produção de enzimas e metabólitos secundários são discutidos neste trabalho. Os resultados obtidos neste trabalho permitem uma melhor compreensão dos mecanismos de ação de isolados de Trichoderma frente ao C. gloeosporioides.

Palavras chave: Controle Biológico, Enzimas hidrolíticas, Metabolitos secundários, Micoparasitismo, Pós-colheita.

• PATRÍCIA SOUZA E SILVA

• Ludovico Migliolo

Dos novos fármacos que chegaram ao mercado, apenas 3,1%, tinham como alvo doenças tropicais negligenciadas (DNTs), por exemplo Doença de Chagas. Assim como as DNTs as infecções nosocomiais são um problema mundial com medicamentos antibacterianos cada vez mais ineficientes levando a resistência e formação de biofilmes cada vez mais comuns nos ambientes hospitalares. Diante deste panorama, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) sintéticos bioinspirados em toxinas têm apresentado potencial para se tornarem alternativas para essa problemática. Os PAMs podem ser encontrados praticamente em todos os reinos desde bactérias a vertebrados. Em anuros, na secreção cutânea já foram descritas e caracterizadas diversas moléculas antimicrobianas, como por exemplo a temporina PTa. Portanto, este trabalho propõe a avaliação de peptídeos análogos a temporina-PTa de Hylarana picturata contra protozoário Tripasoma cruzi e bactérias resistentes, formadoras de biofilme. A metodologia usada no trabalho foi o planejamento racional com base na temporina-PTa (controle) mantendo 70% das características físico-químicas. Após a síntese do controle e análogos foi realizada a quantificação por meio de absorbância. As análises in vitro sobre o efeito antiprozoa foram realizadas frente as formas epimastigota e tripomastigoata em cultura. Já os testes para determinação da concentração inibitória mínima (CIM), concentração bactericida mínima (CBM), concentração inibitória mínima do biofilme (CIMB) e a hemolítica foram realizadas em meio Muller Hinton. Além disso, em adição, estudos in silico de modelagem e dinâmica molecular foram realizados frente as membranas miméticas biológicas Gram-negativa e -positiva. sequências análogas foi a substituição pontual de resíduos de aminoácidos no peptídeo parental com a intenção de aumentar a carga líquida total, ajustar a hidrofobicidade, anfipacidade e reorganizar o momento hidrofóbico mantendo 69% e 77% da característica original. O parental temporina-PTa e os seus análogos temphylarata-1 e temphylarta-2 foram tóxicos para as células do T.cruzi na forma tripomastigota com atividade chegando a 84, 48 e 83 %. O peptídeo parental temporina-PTa eliminou as celulas bacterianas na concentração mínima de 43,4 μM. Os análogos O temphylarata-1 e temphylarata-2 eliminaram em 99,9 % as células bacterianas testadas nas concentrações 3 a 23 μM. A temporina-PTa não apresentou atividade significativa contra a interrupção da formação de biofilme, os análogos interromperam o biofilme nas concentrações 92 a 43,6 μM. Os peptídeos temporina-PTa, temphylarata-1 e temphylarata-2 não foram hemolíticos e nem tóxicos para células Vero. Em in silico os peptídeos parentais perdem sua conformação em água, em contrapartida os análogos permanecem com a conformação helicoidal. Frente a interação peptídeo-membrana temporina-PTa atração entre 2,7 a 3 Å, temphylarata-1 com atrações variando em 2,6 a 3,2 Å e temphylarata-2 de 2,6 a 3,4 Å. Por fim, os peptídeos se mostraram excelentes candidatos para o desenvolvimento de produtos biotecnológicos para combater patógenos.
Palavras-chave: Bactérias patogênicas; Desenho racional; Peptídeos antimicrobianos; Estudo in silico.

• JENYFER VALESCA MONTEIRO CHULLI

A bactéria Borrelia burgdorferi é uma das espiroquetas responsáveis pela doença de Lyme, que acomete diferentes espécies de mamíferos, transmitida por carrapatos durante o repasto sanguíneo. Atualmente, o diagnóstico clínico dos pacientes doentes é baseado nas informações epidemiológicas da região e presença de sintomas característicos, como o eritema migratório cutâneo e comprometimento articular. Por apresentar uma grande diversidade etiológica e polimórfica, as ferramentas de imunodiagnóstico costumam apresentar resultados inespecíficos e transitórios, gerando a necessidade de identificar ou construir novos componentes antigênicos. Este estudo teve como objetivo a aplicação do sistema heterólogo de clonagem GATEWAY®®® (Invitrogen®), a fim de sintetizar a proteína de membrana externa OspC (Outer Surface Proteins), que se demonstra promissora na construção de imunodiagnósticos precisos e vacinas mais eficazes. Para isso, foi amplificado o gene de interesse (OspC) da cepa americana (G39/40) de Borrelia burgdorferi e posteriormente clonado aos plasmídeos pENTR (clonagem) e pDEST (subclonagem e expressão), e expressa com o auxílio do promotor IPTG, evidenciado no gel de poliacrilamida-SDS.
Palavras chave: OspC, Gateway®®®, SYB, Borreliose.

• REGINA MENESES GONÇALVES

• Nuno Fernando Duarte Cordeiro Correia dos Santos

A mastite bovina consiste na inflamação da glândula mamária, sendo desencadeada principalmente por bactérias. Nos bovinos, a mastite tem sido considerada a maior causa de perdas na produtividade de leite. Como tratamento utilizam-se antibióticos, porém, esse tipo de terapia pode deixar resíduos no leite. Diante desse cenário, os peptídeos antimicrobianos (PAMs) surgem como uma alternativa atraente no tratamento de doenças causadas por bactérias. PAMs aparentemente não deixam resíduos no leite e induzem minimamente a resistência bacteriana quando comparados aos tratamentos atuais. Com isso, o objetivo desta pesquisa foi realizar uma prospecção por atividades antibacterianas utilizando cinco PAMs sintéticos (EcDBS1R6, PaDBS1R1, PaDBS1R5, PaDBS1R6 e PyDBS1R8) frente a bactérias relacionadas à mastite bovina. Realizou-se a padronização de cepas bacterianas provenientes de mastite bovina, incluindo Klebsiella sp. e Staphylococcus aureus. Seguidamente foram realizados ensaios de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Foram obtidos resultados de CIM e CBM, que variaram entre 16 e 32 μM. A menor CBM encontrada foi de 16 μM, com PaDBS1R1 frente a uma das cepas de S. aureus. A partir dos resultados de CBM, realizou-se o ensaio de cinética de morte com PaDBS1R1, o qual apontou que este peptídeo é capaz de matar cepas de S. aureus a partir de 2 min. Também foram realizados ensaios hemolíticos e citotóxicos, com eritrócitos murinos e bovinos, e células RAW. Nenhum dos PAMs apresentaram hemólise frente a eritrócitos bovinos. Contudo, frente a eritrócitos murinos e células RAW, dois peptídeos, EcDBS1R6 e PyDBS1R8, apresentaram efeito hemolítico e citotóxico a partir de 12,5 μM (IC50). Ademais, realizou-se a medição do potencial zeta com o peptídeo PaDBS1R1 em uma das cepas de S. aureus, o qual mostrou ter efeito na mudança de carga superficial da bactéria. Em suma, os resultados obtidos nos mostraram que a maioria dos peptídeos, nos ensaios de CIM e CBM, são eficazes contra as cepas de S. aureus e, por outro lado, ineficazes para Klebsiella sp. Além disso, alguns dos PAMs utilizados tem potencial terapêutico, pois apresentam baixa ou nenhuma toxicidade para eritrócitos e células RAW de mamíferos. Contudo, mais experimentos devem ser realizados, como a avaliação do mecanismo de ação do peptídeo mais promissor.
Palavras-chave: mastite bovina, bactérias patogênicas, S. aureus, PAMs, potencial zeta

• JULIANA DA SILVA VIEIRA

O agronegócio brasileiro mostra inúmeras necessidades que se tornam
oportunidades inexploradas. Esse fato motivou o desenvolvimento de uma solução
para atender à equideocultura. Essas demandas exigem soluções cada vez mais
ágeis e assertivas, porque nesse setor econômico as mudanças são muito rápidas e
imprevisíveis. O mercado equestre mostra crescimento anual significativo de
aproximadamente R $ 16,5 bilhões, crescendo 15% ao ano. Dentro dessa realidade,
esta pesquisa apresenta uma solução que promove maior conectividade entre a
comunidade, uma vez que a dificuldade é encontrar rapidamente produtos e
serviços especializados para cavalos diariamente. A pesquisa de mercado foi
realizada por meio de entrevistas e questionários e, com base nas respostas, foi
desenvolvida uma plataforma de teste e o Produto Mínimo Viável (MVP),
disponibilizado em uma versão demo gratuita para os usuários experimentarem a
plataforma de ferramentas. Após um período de teste, o plano de negócios e o plano
de marketing foram executados, criando canais de comunicação por meio de perfis
nas redes sociais. A solução denominada Horse4u Conexões Equestres consiste em
um aplicativo para smartphone que formará um banco de dados alimentado pelos
usuários e consistirá em informações destinadas a conduzir negócios e divulgar as
atividades do setor. Uma plataforma para usuários divulgarem a história de seus
cavalos, com notas sobre títulos, cotidiano, assistência profissional, promovendo o
complience em que usuários validam as informações e classificam os perfis de
acordo com o envolvimento das publicações. O outro meio de operar a plataforma é
conectar profissionais especializados das mais diversas áreas da equideocultura a
potenciais clientes futuros, a fim de acelerar os processos de negócios em uma
comunidade específica, otimizando a oferta e a demanda, atendendo às reais
necessidades apresentadas por essa economia com grande potencial financeiro. O
mercado equestre exige soluções eficientes em que o cavalo é o objetivo,
encurtando a distância entre criadores e profissionais, agilizando processos,
permitindo autonomia para negociações. Isso aquece o setor do agronegócio, gera
fluidez financeira e também colabora para o bem estar dos animais.
Palavras-chave: Agronegócio ; Equinocultura Agri Tech ; Empreendedorismo
Científico; Inovação Empreendedora; Rede de Negócios; Startup

• LUIZ HUMBERTO GUIMARÃES R. JUNIOR

• Alinne Pereira de Castro

Bioma Pantanal é reconhecido nacional e internacionalmente pela exuberância de sua biodiversidade, como a fauna e flora, entretanto pouco se conhece sobre a diversidade e abundância da comunidade fúngica presente no solo. Este bioma vem sofrendo pelas atividades antropogênicas com constantes preenchimentos de sedimentos, principalmente, pelo desmatamento do bioma Cerrado. Tal fato se traduz em alterações nas dinâmicas de inundações de longa duração, sendo determinante na biodiversidade do Pantanal. Diante do exposto, esse estudo tem como objetivo caracterizar o perfil molecular da comunidade fúngica de solos provenientes de áreas de inundação e reserva da região de Nhecolândia no Pantanal, Mato Grosso do Sul. Para tal, foram coletadas 6 amostras de solos do Pantanal, sendo 3 amostras de solo da área inundada e 3 amostras de solo referente à área de reserva. Para avaliar a diversidade e abundância da comunidade fúngica de solos, foi realizado a extração direta de DNA seguido por sequenciamento de DNA da região ITS1/ITS2. O estudo promissor demonstrou uma maior abundancia de filos fúngicos para a área de reserva, destacando Ascomycota e Basidiomycota, que também foram representados como marcadores biológicos nas duas regiões de amostragem. Além disso, área de reserva apresentou maior riqueza de fungos, possibilitando uma diferenciação maior entre as amostras sequenciadas do que as da região inundada. Esses resultados sugerem que o fato de as fisionomias do ambiente ao longo do gradiente de uma reserva serem influentes nas propriedades físico-químicas do solo e nas condições microclimáticas, possuem uma influência na microbiota do solo. Um dos fenômenos naturais mais conhecidos no Pantanal são as inundações, e por isso compreender como esse fator pode afetar a comunidade fúngica do solo pode promover direta ou indiretamente novas estratégias de conservação do uso do solo para o bioma Pantanal.

Palavras-chave: Metagenômica; Fungos de solo; Pantanal; Brasil; Reserva Florestal

• MARCOS FERNANDES MORALES

• Alinne Pereira de Castro

Uma vez que a biologia de invertebrados, vertebrados e micro-organismos necrófagos influenciam na decomposição total da carcaça de vertebrado, abordagens práticas voltadas à microbiologia forense foram desenvolvidas para quesito de preencher as lacunas a respeito de estudos post-mortem de vertebrados. Em primeiro momento, grupos bacterianos são afetados positivamente e negativamente com o progresso de decomposição do vertebrado, modificando a microbiota do mesmo e o solo abaixo em diferentes proporções de abundância. Por sua vez, a microbiota presente do solo abaixo da carcaça é influenciada por alterações nos processos de decomposição, levantando a hipótese de possível biomarcadores do progresso do post-mortem. Com isto, o presente estudo buscou identificar as flutuações na comunidade bacteriana do solo em pontos distintos abaixo da carcaça de Sus scrofa incluindo cabeça, abdômen e região lombar, em períodos controle (anterior a exposição do cadáver suíno ao solo) e estágios de decomposição inchaço (72 horas após exposição) e decomposição avançada (168 horas após exposição), utilizando as regiões V3-V4 do gene 16S rDNA. Mesmo com a maior presença de Proteobacteria e Firmicutes durante os estágios de decomposição avaliados, apenas o Filo Gemmatimonadetes possui um decaimento estatístico em sua abundância populacional com o avançar da decomposição. Por sua vez, as Classes Gammaproteobacteria e Bacilli são relatadas com maior abundância em períodos longos de decomposição enquanto o Gênero Skermanella sp. decai proporcionalmente nos períodos de decomposição aqui avaliados. Embora a comunidade bacteriana do solo seja influenciada por ações externas, bióticas e abióticas, nossos resultados proporcionam base para futuros estudos com microbiota do solo como ferramenta na composição de evidências na microbiologia forense.
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Palavras-chave: Abordagem metagenômica; gene 16S rDNA; Microbiota de solo; Microbiologia forense;

• LUCAS RODRIGUES DE LIMA

• Márcio de Castro Silva Filho

Serina peptidases (SPs) são responsáveis pela maior parte da digestão
proteica primária em espécies de Lepidóptera. Expansões no número de genes que
codificam SPs do tipo tripsina e quimotripsina e a capacidade de regular
positivamente a expressão de alguns desses genes em resposta à ingestão de
inibidores de peptidase (IPs) de plantas foram associados à adaptação de
mariposas da família Noctuidae à herbivoria. Para investigar se eventos de
expansão nessas famílias multigênicas também ocorreram ao longo da evolução de
outros grupos de lepidópteros, foram pesquisados todos os genes que codificam as
enzimas tripsina e quimotripsina em 23 genomas publicamente disponíveis desse
táxon. As análises filogenéticas com as sequências proteicas de ambas as enzimas
mostraram que vários eventos de expansão dessas famílias multigênicas devem ter
ocorrido na história evolutiva da maioria dos Lepidópteros analisados e que esses
eventos deram origem a um grupo muito diversificado de enzimas, incluindo
proteínas sem a tríade catalítica canônica dessas SPs. O perfil de expressão ao
longo do intestino médio e os mecanismos de secreção pelos quais essas enzimas
atingem o conteúdo luminal também foram analisados em larvas de Spodoptera
frugiperda, utilizando análises de RNA-seq e proteômica. Esses resultados apoiam a
proposta de um fluxo contracorrente no intestino médio responsável pelo
direcionamento dessas proteínas para a porção anterior do intestino médio e
mostram que essas enzimas atingem o lúmen do intestino médio por mecanismos
de exocitose e secreção microapócrina.

Palavras Chaves: 

• ANDRÉ DA SILVA DIAS

Programas de promoção à saúde em local de trabalho e praças podem ser eficazes na saúde do indivíduo. Os dispositivos móveis oferecem aos usuários diversos recursos, como entretenimento, negócio, estudo e atualmente desenvolvimento de hábitos saudáveis. Essa tecnologia digital de saúde móvel vem sendo utilizada no monitoramento, controle e prevenção de sobrepeso, obesidade e doenças relacionadas à falta de atividade física. O objetivo geral deste estudo foi desenvolver um aplicativo móvel para estimular e educar a prática regular de atividade física dentro e fora do ambiente de trabalho. O aplicativo foi desenvolvido para a plataforma androide, com o objetivo de auxiliar o usuário a controlar seus passos diários, peso ideal, quantidade diária de água ingerida, pressão arterial e disponibilizará uma lista de exercícios de alongamento, para que o indivíduo se movimente dentro ou fora do ambiente de trabalho sem que prejudique seu desempenho funcional. A partir das informações anotadas pelo usuário final, será possível que o mesmo monitore e observe essas variáveis. O aplicativo desenvolvido será útil para diminuição da inatividade física, auxiliando na prevenção das doenças crônicas não transmissíveis, na melhora e prevenção das dores musculoesqueléticas e nas atividades laborais diárias.
Palavras-chave: Aplicativo móvel; Tecnologia móvel; Saúde; Atividade laboral; Doenças crônicas não transmissíveis.

• CLAUDIA AGUIAR DOS SANTOS

• Ludovico Migliolo

A acne vulgar manifesta-se frente a inúmeros fatores patogênicos como a formação do comedão ou comedogênese, produção de sebo e reprodução bacteriana ou colonização pelo Propionibacterium acnes. Os tratamentos mais efetivos, sejam tópicos ou sistêmicos, causam variados efeitos colaterais aos pacientes além de induzir a resistência bacteriana, um desafio para a saúde pública global. Assim, existe a necessidade de desenvolver novas moléculas para o tratamento de doenças causadas por bactérias, e os Peptídeos Antimicrobianos sintéticos tornam-se uma opção no controle da patogenese. Este estudo propõe avaliar a ação dos pepitidios sintéticos isolados de invertebrados a Temporina Tpa, Latarcina- 3A e Macropina -2, e os análogos Temphylarata-1, -2, Latarasina-2, -3 e - 4 frente a P.acne. Após o estudo teórico da estrutura tridimensional, os peptídeos citados foram submetidos aos ensaios in vitro para avaliar seu perfil ,capaz de causar Concentração Inibitória Mínima (CIM), Concentração Bactericida Mínima (CBM) e hemólise. Observou-se que nem todos peptideos selecionados foram efetivos como antimicrobianos, a exemplo da temporina-PTa que não foi ativa no controle de crescimento da P. acnes. No entanto, os peptídeos temphylarata -1 e -2 mostraram resultados positivos bactericida nas concentrações de 91,87 e 87,4μM, respectivamente. Embora o peptídeo latarcina-3a não tenha apresentado atividade bactericida causou diminuição de crescimento, e seus análogos sintetizados causaram inibição de crescimento e ainda tiveram atividade antimicrobiana atribuída à concentração de 19,6μM para a latarasina-2, 10,8μM para a latarasina-3 e 2,7μM para a latarasina-4. Igualmente ativo o peptídeo macropina-2 apresentou uma inibição em 39,2μM e ação bactericida em 79,4μM, relato inédito para essa finalidade. Ao comparar a ação entre os peptídeos ativos, a latarasina-4 demonstrou ser o melhor candidato para o desenvolvimento de biofármacos no combate e tratamento de P. acnes.

Palavras-chave: antibióticos; acnes vulgar; bactericida; biofármacos.

• Thais Maryelle dos Santos Costa Ponce

A obesidade é considerada uma epidemia pois atinge cerca de 37,9% da população adulta brasileira, sendo Campo Grande a capital que possui o maior número de adultos obesos 27,9 %. A obesidade é definida como uma doença crônica inflamatória de baixo grau, por envolver marcadores e citocinas inflamatórias. Dessa maneira, pesquisas tem sido realizada com o foco de prevenir ou intervir nesta doença. É evidenciado que a comunidade bacteriana intestinal está envolvida na etiopatogênese da obesidade. As fibras apresentam características físico-químicas importantes na modulação dessa comunidade bacteriana, por esse motivo, são consideradas essenciais e de extrema importância para o consumo humano. Nesse contexto, destaca-se o fruto Acrocomia aculeta, predominante na região do cerrado e popularmente denominada bocaiuva, pois apresenta em sua composição significativa concentração de fibra solúvel e insolúvel. Portanto, o objetivo do presente estudo foi verificar o perfil da comunidade bacteriana intestinal de camundongos da linhagem Swiss, induzidos a obesidade por dieta hiperlipidica (high fat) e tratados com 4% de polpa liofilizada de bocaiuva. Sendo assim, no tempo inicial, foram coletadas amostras fecais de 9 camundongos Swiss adultos machos, distribuídos nos grupos experimentais, controle (CS n=3), high fat (CHF n= 3) e Polpa de bocaiuva à 4%( CHFP4 n= 3), e no tempo final (após 90 dias de tratamento) Novas amostras de fezes foram coletados dos grupos experimentais: FS (n=3), FHF (n=3) e FHFP4 (n=3), totalizando 18 amostras analisadas. Para avaliar a comunidade bacteriana, a extração direta de DNA metagenômico foi realizada a partir de amostras fecais, seguido pela amplificação do gene 16S rDNA por reação em cadeia da polimerase (PCR), e posterior sequenciamento de DNA em plataforma Illumina HiSeq. Como resultado, o filo Firmicutes apresentou maior abundância relativa em todos os grupos analisados, seguido pelos filos Bacteroidetes, Proteobacteria, Deferribacteres e Actinobacteria. Em nível de gênero, a abundância relativa de Blautia, Paenibacillus e Lactobacillus foram maiores no grupo CHFP4 e FHFP4. Por sua vez, os grupos CS, CHF e CHFP4 apresentaram similaridade nas comunidades bacterianas. Diante do exposto, a dieta high fat acrescida de 4% de polpa de Bocaiuva, foi capaz de modular a microbiota intestinal, principalmente no nível de gênero. Diante da perspectiva de estudo metagenômico, esta pesquisa demonstrou que a associação de fibra alimentar a dieta, poderá auxiliar na intervenção nutricional da obesidade.
Palavras chaves: Obesidade, Prebióticos, Microbiota Intestinal.

• Luccas Pereira Pires

• Alinne Pereira de Castro

O bioma Pantanal é reconhecido nacional e internacionalmente pela exuberância de sua biodiversidade, como a fauna e flora, entretanto pouco se conhece sobre a diversidade e abundância da comunidade bacteriana presente no solo. Este bioma vem sofrendo com constantes preenchimentos de sedimentos, principalmente do Cerrado. Tal fato se traduz em alterações nas dinâmicas de inundações determinantes na biodiversidade do Pantanal. Entretanto, devido a estrutura do solo os estudos de diversidade e abundância de micro-organismos permanecem ainda restritos. Contudo, a utilização de técnicas moleculares, incluindo a abordagem metagenômica, tem-se mostrado promissora e tornando possível acessar a diversidade microbiana associadas a inundação no bioma Pantanal. Diante do exposto, esse estudo tem como objetivo caracterizar o perfil molecular da comunidade bacteriana de solos provenientes de áreas de inundação e reserva da região de Nhecolândia no Pantanal, Mato Grosso do Sul. Para tal, foram coletadas seis amostras de solos do Pantanal, sendo três amostras de solo da área inundada e três amostras de solo referente à área de reserva. Para avaliar a diversidade e abundância da comunidade bacteriana de solos, foi realizado a extração direta de DNA seguido por sequenciamento de DNA das regiões V3-V4 para o gene 16S rDNA. O estudo demonstrou uma diferenciação do comportamento do perfil taxonômico bacteriano entre as áreas do Pantanal, frente a presença de água, como o gênero Pseudarthrobacter e a classe Clostridia que houve um destaque ao apresentarem um aumento na sua abundância relativa em solos inundados, sendo revelados com biomarcadores de áreas que sofrem com essa dinâmica ambiental. Vale a pena ressaltar que à análise realizada no presente estudo também promove impulsos para novos trabalhos, como nas áreas de biorremediação e bioprospecção, na região pantaneira.

Palavras-chave: Comunidade Bacteriana; solo; Metagenômica; Bioma Pantanal.

• Jucélia dos Santos Silva

• Carina Elisei de Oliveira

A brucelose é uma doença infectocontagiosa, ocasionada por bactérias, gram-negativas, do

gênero

Brucella responsáveis por ocasionar perdas produtivas nos animais domésticos e

seres humanos, além de grande morbidade. Com a execução do presente trabalho, objetivouse

estudar a brucelose humana, sua correlação com doenças articulares, bem como

identificar os principais fatores de risco associados a brucelose no Brasil, tendo como base

um banco de dados do Ministério da Saúde, via sistema eletrônico do Serviço de Informação

ao Cidadão (e-SIC). Para tanto, foram adquiridas 38 amostras de soro e sangue de um banco

de amostras biológicas, provenientes de pacientes atendidos no centro de reumatologia em

Campo Grande-MS. Essas amostras foram submetidas à técnica sorológica do antígeno

tamponado acidificado em placa (PABA) e a técnica molecular de reação em cadeia da

polimerase (PCR). Das 38 amostras de soro submetidas ao PABA, 65,78% (25/38) foram

positivas, sendo 44,73% (17/38) desses provenientes de indivíduos do sexo feminino e 21,05%

(08/38) do masculino. Na PCR 55,26% (21/38) das amostras de sangue testadas foram positivas,

sendo que 36,84% (14/38) provieram de indivíduos do sexo feminino e 18,42% (7/38) do

masculino. Os produtos de PCR foram clonados, sequenciados, e apresentaram 100% de

identidade para o gênero

Brucella. Em relação aos fatores de risco associados à brucelose, foi

possível avaliar que 28,94% (11/38) residem em área rural, e 18,42% (7/38) exercem função em

área rural e os dois grupos somados, representaram 47,36% do total (18/38); tais indivíduos

apresentaram também convívio com animais. A análise dos fatores de risco à brucelose, realizada

com base no banco de dados do Ministério da Saúde (coletados de 2012 a 2017) via sistema

eletrônico do Serviço de Informação ao Cidadão (e-SIC) indicaram que, indivíduos que habitam

área urbana apresentaram maior prevalência da doença (33,71%) em detrimento dos que vivem

em área rural (28,29%) (p = 0,007), fato que pode estar relacionado à ocupação laboral em que

aqueles que exercem atividade de risco à infecção apresentaram maior prevalência (94,5%) da

doença quando comparados com trabalhadores que não exercem atividade de risco (82, 15%) (p

< 0,001), muitos indivíduos trabalham em áreas rurais exercendo atividade de risco onde se

infectam, porém residem nas cidades. Aparentemente a atividade laboral representa o maior fator

de risco à infecção por

Brucella, pois os dados demonstraram também que jovens e adultos são

as faixas etárias de maior prevalência de brucelose (35–36% de prevalência vs. 8–26% em

crianças, adolescentes e idosos; p < 0,001) por ser a época de ativa de trabalho, as regiões do

país onde as atividades ligadas à pecuária são mais intensas apresentam maiores índices da

doença (Centro Oeste com prevalência de 77,1% vs. 23,5–44,5% nas outras regiões; p < 0,001)

e o sexo masculino é mais infectados que o sexo feminino (prevalência de 34,81% e 23,86%,

respectivamente; p < 0,001) devido ao fato que maioria dos trabalhadores nesses setores são do

sexo masculino. Com a realização desse trabalho foi possível constatar a presença de anticorpos

e DNA de

Brucella nas amostras biológicas estudadas e com as análises dos dados e-SIC, que

há necessidade de maiores estudos sobre a epidemiologia e os impactos da prevalência da

brucelose humana no Brasil, principalmente porque a doença causa grande impacto na qualidade

de vida do indivíduo e, atualmente muitas informações são lacunares, sobretudo o acesso da

população às mesmas.

PALAVRAS-CHAVE: Saúde Pública, Diagnóstico Molecular, Doenças Articulares.

• Fernanda de Cássia Gonçalves Alves

• Alinne Pereira de Castro

Serpentes cativas podem enfrentar consequências do desequilíbrio nutricional que pode ser proveniente da alteração de apetite, digestão, assimilação dos nutrientes e até mesmo um manejo alimentar inadequado, desenvolvendo distúrbios como hipervitaminose, hipovitaminose, caquexia e obesidade. Diversas pesquisas têm tentado ir além de fatores externos e exploram a influência e contribuição da microbiota intestinal com as alterações na fisiologia normal, bem como no surgimento de doenças em seus hospedeiros. Neste sentido, o objetivo deste estudo foi, primeiramente, desenvolver um protocolo de classificação por escore da condição corporal para serpentes Crotalus durissus, afim de separar os grupos experimentais em: magros, normais e obesos. Após a seleção das serpentes, a composição e diversidade da comunidade bacteriana associada à cavidade cloacal de Crotalus durissus, sob o efeito do manejo alimentar (50 dias de jejum) foi avaliada através do gene 16S r DNA a partir de “swab” com amostras da cavidade cloacal de três serpentes de cada grupo (n=9) durante 2 períodos: antes do jejum (Tempo 0) e coleta após 50 dias de jejum (Tempo 50). Após extração com kit DNeasy® PowerSoil® Kit (Qiagen), sequenciamento de DNA e aplicação das ferramentas de bioinformática as amostras demostraram redução no número de OTUs após o jejum prolongado. Em relação a abundância relativa dos filos pode-se observar que houve dominância dos filos Proteobacteria e Bacteroidetes para as amostras referentes antes do jejum, em contrapartida, houve alterações na proporção dos filos bacterianos, com redução da abundância relativa de Proteobacteria e aumento de Bacteroidetes nos grupos experimentais normais e magras após o jejum prolongado. As amostras demostraram maior proximidade nas análises de PCA e análise de variância quando se levou em consideração o tempo de jejum prolongado do que quando comparadas por escore corporal. Este estudo fornece dados que permitem mudanças no manejo alimentar e manutenção de Crotalus durissus em cativeiro. É importante ressaltar que, o estudo proposto fornecerá a primeira análise simultânea de alfa e beta diversidade em comunidades bacterianas, presentes em amostras associada à cavidade cloacal de Crotalus durissus com escore corporais diferentes, frente a um período prolongado de jejum por meio de análises metagenômicas.

PALAVRAS-CHAVE: Escore da Condição Corporal. Gene 16S rDNA. Crotalus durissus.

• Robéria Mandú da Silva Siqueira

• Flábio Ribeiro de Araújo

Introdução: O Teste Rápido Molecular – Tuberculose, GeneXpert Mycobacterium tuberculosis/Rifampicina (GeneXpert MTB/RIF), permite a confirmação do diagnóstico da Tuberculose, identificando a presença do Complexo Mycobacterium tuberculosis (CMT) e mutações que conferem resistência à rifampicina. Objetivo: Analisar o desempenho do Teste Rápido Molecular (TRM) no diagnóstico da Tuberculose pulmonar (TBP) e extrapulmonar (TBE), de laboratório de referência do Mato Grosso do Sul - Brasil. Métodos: Trata-se de uma pesquisa quantitativa, descritiva, retrospectiva com utilização de banco de dados de resultados laboratoriais, no contexto da rotina operacional de um hospital de referência para diagnóstico e tratamento de tuberculose no estado do Mato Grosso do Sul, Brasil, durante o período de agosto de 2015 a junho de 2018. A análise estatística foi realizada com variáveis categóricas de resultados laboratoriais expressas em frequência e o teste não paramétrico do qui-quadrado, com auxílio do programa GraphPad Prisma, considerando um nível de significância de 5%. O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa de Seres Humanos, vinculado a Universidade Federal do Mato Grosso do Sul (CAAE: 44087215.3.0000.0021). Resultados: Foram analisadas 1023 amostras clínicas de pacientes submetidas ao GeneXpert MTB/RIF simultaneamente com a realização do exame de cultura para M. tuberculosis. Houve predominância do sexo masculino 719 (70,2%) e a média de idade da população do estudo foi de 47,45 ± 16,52 anos. Os pacientes atendidos em hospitais constituíram a principal origem das amostras testadas, com 902 (88,1%). Obteve-se pouca diferença em soronegativa e soropositiva para o HIV. Já em 26 das amostras a procedência foi de moradores de rua (2,5%). Das amostras pulmonares o escarro foi 576 (82,2%), já as amostras extrapulmonares o líquido cefalorraquidiano foi maior com 168 (52,3%). O GeneXpert MTB/RIF apresentou sensibilidade de 63,0% e a especificidade foi de 98,6% quando comparado a cultura. Não foi significativo o resultado das amostras de resistência à rifampicina (RIF). O Teste Rápido Molecular - Tuberculose demonstrou ser mais sensível em pacientes com HIV soropositivo com 95,2 [76,2-99,8], porém mais específico para HIV negativo com 98,2 [96,3 – 99,3], além disso, demonstrou ser mais sensível em pacientes privados de liberdade com 75,0 [55,1 – 89,3] do que moradores de rua 38,4 [13,8 – 68,4], porém, mais específico para moradores de rua com 100 [75,3 – 100]. Conclusão: No campo operacional deste estudo o TRM-TB apresentou menor sensibilidade que a maioria dos relatos para tuberculose pulmonar, porém, com especificidade significativa, sendo uma ferramenta rápida para a triagem de casos novos. Foi identificado entre moradores de rua com baixa sensibilidade do teste molecular. O TRM-TB não elimina a necessidade de métodos diagnósticos tradicionais.

• Gustavo da Silva Andrade

• Marco Hiroshi Naka

A icterícia é caracterizada por uma coloração amarelada da pele e de outros órgãos e é uma das características da hiperbilirrubinemia, que está relacionada a um acúmulo excessivo de bilirrubina no sangue e a sua impregnação na pele. Vários casos são classificados na condição benigna, contudo, existe chance de ocorrência de encefalopatia, que é uma lesão que pode acarretar a paralisia cerebral e ocorre quando existe uma grande quantidade de bilirrubina no organismo. Atualmente, são realizados três tipos de exames da icterícia: avaliação clínica pela cor da, por método bioquímico e bilirrubinômetro cutâneo. Nas circunstâncias em que a bilirrubina é elevada, o tratamento pode ser realizado através da fototerapia ou mesmo pela troca volemia, que é a exsanguineotransfusão, a qual é reservada somente para as condições mais graves, isto é, hiperbilirrubinemia muito alta. Neste projeto, propõe-se a construção de um equipamento baseado em um sensor de cor, para que de forma não invasiva e precisa, seja feita a detecção da icterícia em recém-nascidos. O sensor de cor tem por objetivo registrar a cor de uma superfície por meio da emissão de um feixe de luz separando estas informações nas coordenadas cromatográficas RGB. O resultado deste projeto foi a criação de um equipamento não invasivo para um rápido diagnóstico da icterícia em recém-nascidos. Um impacto e benefício do desenvolvimento deste sistema de diagnóstico da icterícia em recém-nascido será a rapidez no diagnóstico e um novo conceito.

Palavras-chave: Engenharia Biomédica; Icterícia neonatal; Sensor de cor.

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• Taynara Nunes Pasquatti

• Flábio Ribeiro de Araújo

O objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade genética de Mycobacterium bovis da região Amazônica do Brasil. Sessenta e três amostras de tecidos de bovinos e bubalinos foram obtidas em abatedouros-frigoríficos sob Serviço de Inspeção Veterinária Estadual nos municípios de Urucará, Presidente Figueiredo, Parintins, Itacoatiara, Careiro, Careiro da Várzea, Manacapuru, Autazes/Comunidade Novo Céu, Manicoré e Apuí, estado do Amazonas; e dos municípios de Alenquer, Monte Alegre, Prainha e Óbidos, estado do Pará. As amostras foram isoladas em meio de cultivo Stonebrink, e as colônias com morfologia compatível com M. bovis foram analisadas por PCR convencional, com iniciadores de DNA flanqueando a região de diferenciação 4 (Region of Difference 4 - RD4). Após confirmação, as colônias de M. bovis foram analisadas por espoligotipagem. Foram identificadas 44/63 (69,8%) amostras com crescimento no isolamento micobacteriano compatíveis com M. bovis, das quais 35 (79,5%) foram positivas para M. bovis na PCR. Na técnica de espoligotipagem, observou-se seis genótipos distintos (SB0822 n=17, SB0295 n=19, SB1869 n=5, SB0121 n=2, SB1800 n=1 e SB1608 n=1). Quatro genótipos (SB0295,
SB0121, SB1800 e SB1869) foram descritos anteriormente em diferentes regiões do Brasil: estado da Paraíba (Nordeste), São Paulo (Sudeste), Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Goiás (Centro-Oeste) e Rio Grande do Sul (Sul), bem como já foram descritos em diversos países como Argentina, Venezuela, México, Espanha e Portugal. Já os genótipos SB0822 e SB1608 não haviam sido descrito anteriormente no Brasil demonstrando assim, o polimorfismo existente entre os perfis genéticos de
M. bovis nos animais da região Amazônica.

Palavras-chaves: Tuberculose bovina, PCR, espoligotipagem, região Amazônica

• Suellen Rolon de Souza Silva

O processo inflamatório é uma complexa resposta biológica contra a lesão tecidual (por exemplo,
estresse, irritantes e radiações) e infecções (microbianas e virais). A inflamação está associada ao
processo de várias doenças, incluindo doenças cardiovasculares, doenças neurodegenerativas,
diabetes, câncer, obesidade, asma, doenças autoimunes, aterosclerose e artrite reumatóide. Os
fármacos anti-inflamatórios não-esteroidais, mais utilizados no processo inflamatório, possuem
inúmeros efeitos colaterais, tais como: irritação gástrica, ulceração, sangramento, insuficiência renal,
insuficiência hepática, cefaléia, anemia hemolítica, exacerbação de asma, erupções cutâneas,
angioedema e prurido; o que motiva a constante busca por novos compostos com poder antiinflamatório.
Nesse contexto, a modificação molecular é uma alternativa com grande perspectiva de
sucesso, já que estudos que visam o planejamento e desenvolvimento de fármacos têm mostrado
alta aplicabilidade nas mais diversas áreas de saúde. Os compostos constituídos pelas bases de
Schiff, são potenciais candidatos, apresentando uma variada atividade biológica. Dessa forma, o
objetivo do trabalho foi avaliar a atividade farmacológica do composto sintético (E)-2-(((paratolilimino)
metil)fenol (PTMF) in vitro e in vivo. Para atingir o objetivo do trabalho foram utilizados os
seguintes métodos: avaliação da atividade citotóxica pelo método de hemolise (100, 50, 25, 12,5 e
6,25 μg / mL), viabilidade celular em células do Tumor Ascítico de Ehrlich (TAE) e do baço de murinos
in vitro, pelo método do MTT (100, 50 e 25 μg/mL) em 24 e 48horas. A avaliação antitumoral in vivo
do PTMF foi conduzida por 14 dias com animais tratados ou não com o composto. A atividade antiinflamatória
foi avaliada pelo método de migração de neutrófilos para cavidade peritoneal de
camundongos (100, 50 e 25 μg/animal). A atividade antinociceptiva foi avaliada pelo método de
contorções abdominais em camundongos (100 μg/animal) e teste da formalina em camundongos (100
μg/animal), e a atividade genotóxica, pelo método de micronúcleo. O PTMF não apresentou atividade
hemolítica em nenhuma das concentrações testadas. O PTMF foi capaz de reduzir, no tempo de 24
horas, a viabilidade das células do baço em 12,6%; na concentração de 100μg/mL e 17% com as
concentrações de 50 e 25 μg/mL. Após 24 horas de incubação o PTMF foi capaz de reduzir a
viabilidade das células do TAE em 36%; na concentração de 100μg/mL, 7% na concentração de 50
μg/mL e 16% na concentração de 25 μg/mL. Após 48horas de incubação, nas concentrações de 100,
50 e 25 μg/mL, foi observada uma redução da viabilidade das células do baço de 38%, 33% e 31%
respectivamente e um efeito mais expressivo do composto diminuindo a viabilidade das células do
TAE em 61,6% na concentração de 100 μg/mL; 57,3% na concentração de 50 μg/mL e 58,2% na
concentração de 25 μg/mL. No ensaio antitumoral in vivo não foi observada diferença entre o número
de células tumorais e leucócitos das cavidades peritoneais dos camundongos tratados ou não com
PTMF; e na contagem diferencial dos leucócitos, o aumento de células tumorais não foi
acompanhado pelo aumento do número de leucócitos. O PTMF foi capaz de inibir a migração de
neutrófilos nas doses de 100, 50 e 25μg/animal em 35%, 70% e 45%, respectivamente. O PTMF
demonstrou uma atividade antinociceptora reduzindo o número de contorções abdominais na dose
administrada (100μg/animal) e no ensaio da formalina, o composto (100μg/animal) foi capaz de
reduzir as lambeduras dos animais na fase 2 do teste, semelhante ao controle de indometacina. No
ensaio de genotoxicidade o composto não foi capaz de induzir micronúcleos em hemácias
policromáticas. Novos ensaios serão realizados para elucidar os mecanismos de ação
desempenhado pelo PTMF.
Palavras-Chave: Bases de Schiff; Inflamação,Nocicepção, Migração de Neutrófilos, Antitumoral.

• Daniel Augusto Dias Araújo

Tem crescido consideravelmente o estudo de novos lubrificantes que sejam menos agressores ao meio ambiente e que atendam algumas demandas específicas. O estudo do atrito, desgaste e lubrificação em materiais e sistemas biológicos é chamado de biotribologia. Com este estudo podemos avaliar as condições de aplicação de óleos vegetais em lubrificação. Esta aplicação nos traz a vantagem de ser menos agressivo ao meio ambiente devido à baixa toxidade dos óleos vegetais, comparado aos óleos minerais e sintéticos. Este projeto tem por objetivo aperfeiçoar um equipamento responsável por fazer testes de atrito, chamado tribômetro. Estes testes avaliam o potencial de aplicação de um determinado óleo em lubrificação. Em testes iniciais com o tribômetro, verificou-se a necessidade de aperfeiçoamento do equipamento para uma maior precisão nos resultados. Este aperfeiçoamento consiste em testes de repetibilidade e avaliações do estado de seus componentes eletrônicos, substituindo o necessário, com o intuito de reduzir os níveis de ruídos. Foi constatado, a partir de testes de repetibilidade, que os sensores que coletavam os dados estavam danificados, talvez devido a instalação de forma inadequada, não conseguindo fornecem resultados confiáveis, logo tiveram de ser substituídos, passando por um cuidadoso processo de colagem e, para verificação da confiabilidade, os sensores passaram novamente por testes de repetitividade. Com os dados de atrito, calcula-se o coeficiente de atrito dos óleos e com isso o desempenho de lubrificação. Neste desempenho, a viscosidade é um fator que afeta significativamente a lubrificação, devido sua forte influência da temperatura. Para controlar este fator, foi melhorado um sistema eletrônico para o controle da temperatura, utilizando pastilhas termoelétricas de efeito Peltier para alteração da temperatura dos óleos, juntamente com sensor de temperatura encapsulado para o monitoramento em tempo real da temperatura do óleo biolubrificante durante os testes. Foi constatado que o circuito de acionamento da pastilha termoelétrica ocasionava queima de componentes eletrônicos, devido à alta passagem de corrente elétrica, próxima de 2 Amperes. Para solução deste problema, o circuito de 

acionamento da pastilha foi substituído por um relé de acionamento em que liga ou desliga o fluxo de corrente elétrica da pastilha conforme necessário. Para este sistema de controle de temperatura, foi utilizado um arduíno Mega 2560 para a comunicação entre o sensor de temperatura e a pastilha termoelétrica, acionada a partir de um relé também conectado ao arduíno. Com as manutenções e aperfeiçoamentos do tribômetro, foram feitos testes com óleo de soja para que se tenha um controle para futuros testes com outros óleos vegetais. Foram feitos cinco testes em cinco variações de temperatura e em três superfícies diferentes. As faixas de temperatura foram 25, 30, 35, 40 e 45 °C. As superfícies utilizadas foram obtidas a partir de impressão 3D. Com isso, obteve-se uma superfície lisa sem textura para o controle, uma superfície com textura da pata da lagartixa com perfil circular e uma superfície com textura da asa da coruja com perfil ramificado. Esta última apresentou menor coeficiente de atrito até 35 °C e depois ficou similar com a superfície de controle. Como a intenção é reduzir o coeficiente de atrito, qualquer superfície com coeficiente maior que o coeficiente da superfície de controle é descartado. Portanto, devido ao menor coeficiente de atrito até certa temperatura, a superfície com textura da asa da coruja com perfil ramificado foi a que melhor se comportou. Como pode ser observado nos resultados, a volta do corpo de prova gerou, em sua maioria, maior coeficiente de atrito do que na ida. Esse resultado pode ter sido influenciado devido ao sentido de impressão em que a impressora 3D trabalha, deixando pequenas “saliências microscópicas” na texturização. Como o objetivo era aperfeiçoar o equipamento de medição de atrito, os testes foram conclusivos e confirmaram a confiabilidade do tribômetro.
Palavras-chave: Biomimetismo; Biolubrificante; Tribômetro.

• Adriana Galvão Sabioni Ribas

A literatura é provida de muitos estudos acerca dos efeitos da Solanum melongena (berinjela) enfocando prioritariamente sobre as concentrações plasmáticas de triglicerídeos, colesterol total e frações lipídicas. Muitos dos compostos presentes no gênero Solanum e em especial na Solanum melongena, como os flavonoides, alcaloides, taninos, esteróis e outros, são providos de um grande espectro de efeitos biológicos, com destaque a ação antioxidante, antimutagênica, analgésica e anti-inflamatória. Entretanto não há estudos que demonstrem de forma inequívoca os efeitos da berinjela roxa sobre a resposta inflamatória e comprovem sua ação analgésica e antigenotóxica. Nesse contexto, a elucidação dos efeitos anti-inflamatórios e analgésicos podem corroborar com o uso da S. melongena, com potencial na prevenção de doenças inflamatórias e aquelas associadas à algesia e genotoxicidade. O presente trabalho avaliou a atividade anti-inflamatória, analgésica e mutagênica da solução hidroalcoólica de Solanum melongena em modelo de migração de neutrófilos para a cavidade abdominal de camundongos machos e fêmeas da linhagen Balb-C (CEUA 05/2016) e teste do edema de pata. Também foi investigado o potencial analgésico do extrato por meio de contorções abdominais induzidas por ácido acético e teste de formalina e o teste de genotoxicidade por contagem de micrúnucleos na linhagem Swiss. Os resultados obtidos demonstram a capacidade de inibição da migração de neutrófilos para a cavidade peritoneal de camundongos em cerca de 70%, diminuição expressiva do edema de pata (aproximadamente 80% menor) e ação antinociceptiva com diminuição/inibição no número de contorções promovidas pelo ácido acético em torno de 70%, resultado este semelhante ao obtido tratado com AAS, bem como redução da dor inflamatória no teste da formalina, diminuindo em 50% a resposta dolorosa na fase 2 do teste. Ainda foi possível observar a redução do número de hemácias normo e policromáticas micronucleadas (50% e 90% respectivamente) quando comparado com o grupo que recebeu apenas a colchicina, no teste de micronúcleos. Desta forma, demonstramos que o extrato é provido de efeito anti-inflamatório, analgésico e antigenotóxico e que estes parecem correlacionar-se com o perfil farmacognóstico do extrato, composto majoritariamente por compostos fenólicos, flavonóides e taninos.
Palavras-chaves:
1. Inflamação
2. Berinjela
3. Nutracêutico
4. Analgesia
5. Genotoxicidade
6. Dor

• Bárbara Ortiz Mendes

Mycobacterium bovis, um membro do complexo Mycobacterium tuberculosis, é o
agente causador da tuberculose em bovinos, enfermidade de alta relevância
econômica e também influencia o comércio dos animais e de seus produtos, além de
constituir-se uma zoonose. A genotipagem por espoligotipagem contribuiu para
melhor compreensão acerca da epidemiologia das infecções por M. bovis,
proporcionando o aumento da eficiência dos programas de controle da doença. O Rio
Grande do Sul possui elevada importância na produção brasileira e faz fronteira com
outros países nos quais também há focos da enfermidade. Desta forma, a
genotipagem de isolados de M. bovis deste estado dará maiores subsídios para o
controle da bTB, acelerando a redução de sua prevalência e colaborando com futuras
políticas de erradicação da enfermidade. Assim sendo, a proposta deste estudo
baseou-se no isolamento, identificação e genotipagem de M. bovis, a partir de lesões
sugestivas de tuberculose de bovinos advindos da microrregião de Lajeado-Estrela,
RS. As amostras de tecido com lesões sugestivas de bTB foram processadas e
cultivadas em meio Stonebrink, e as colônias com características compatíveis com M.
bovis foram submetidas à extração de DNA e PCR. Após a espoligotipagem, os
espaçadores foram visualizados por detecção de quimioluminescência e os padrões
encontrados analisados comparando aos já descritos na base de dados. Os isolados
apresentaram três diferentes agrupamentos e um apresentou perfil único, não
identificado anteriormente: 32 isolados apresentaram o padrão SB0121, seis SB0295
e um isolado SB1683. Os resultados obtidos podem contribuir com estudos
epidemiológicos, uma vez que detecta e caracteriza a variabilidade genética dos
isolados.
Palavras chave: Mycobacterium bovis, espoligotipagem, tuberculose bovina, Rio
Grande do Sul.

• Bruna Oliveira Costa

Os biofilmes bacterianos representam um dos principais problemas de saúde pública, uma vez que têm sido associados a aproximadamente dois terços de todas as infecções clínicas. Além disso, as células sésseis que constituem o biofilme podem desenvolver resistência a elementos do sistema de defesa do hospedeiro e aos antimicrobianos convencionais, o que dificulta o tratamento e contribui para o aumento da morbidade e mortalidade dos pacientes. Portanto, a busca por moléculas com ação antibiofilme torna-se extremamente necessária, e os peptídeos desenvolvidos a partir de otimização in silico surgem como uma estratégia alternativa e promissora de tratamento. Nesse contexto, objetivou-se avaliar a atividade antibiofilme dos peptídeos otimizados guavanina13, guavanina14 PaDSBS1R1 e PaDBS1R3F4, sobre biofilmes de P. aeruginosa, K. pneumoniae ATCC e KPC,E. coli ATCC e KPC pelo método de microdiluição de peptídeos em microplacas de 96 poços, sendo as concentrações testadas de 2 - 64 μg.mL-1. Mediante a determinação da concentração inibitória mínima para células planctônicas e biofilmes (CIM e CIMB respectivamente), observou-se que guavanina13 e guavanina14 demonstraram atividade específica para inibição da formação do biofilme das mesmas cepas bacterianas, K. pneumoniae ATCC (CIMB = 4 μg.mL-1 para ambos os peptídeos) e E. coli ATCC (CIMB = 16 e 32 μg.mL-1, respectivamente). Já o peptídeo PaDSBS1R1 apresentou seletividade para inibição da formação de biofilmes de quatro cepas em concentrações que não afetaram o crescimento planctônico, sendo elas, K. pneumoniae ATCC (CIMB = 8 μg.mL-1 e CIM = 64 μg.mL-1), K. pneumoniae KPC (CIMB = 64 μg.mL-1 e CIM = >64 μg.mL-1),E. coli ATCC (CIMB = 2 μg.mL-1 e CIM = >64 μg.mL-1) e E. coli KPC (CIMB = 8 μg.mL-1 e CIM = 64 μg.mL-1). Na triagem da atividade antibiofilme dos peptídeos sobre biofilmes maduros formados em 24h, a guavanina13 demonstrou um potencial inibitório sobre K. pneumoniaeKPC e E. coli ATCC. A guavanina14, assim como o PaDBS1R3F4, apresentaram um potencial inibitório apenas sobre K. pneumoniae KPC. O peptídeo PaDSBS1R1 apresentou potencial inibitório contra as cepas de P. aeruginosa,K. pneumoniae ATCC e E. coli ATCC e, um potencial erradicatório sobre K. pneumoniae KPC. A combinação dos peptídeos com o antimicrobiano ciprofloxacina não demonstrou um efeito sinérgico sobre ainibiçãode células planctônicas ou na formação de biofilmes, ou ainda na inibição/erradicaçãodos biofilmes maduros. Na determinação da citotoxicidade dos peptídeos sobre eritrócitos de camundongo, o peptídeo PaDSBS1R1 apresentou cerca de 65% de hemólise na concentração de 640 μg.mL-1. Em contrapartida guavanina13, guavanina14, e PaDBS1R3F4 demonstraram completa ausência de atividade hemolítica. Em conclusão, estes resultados sugerem que os peptídeos otimizados, guavanina13, guavanina14 e PaDBS1R3F4, podem ser potentes inibidores da formação de biofilme, podendo deste modo se constituíremcomo uma nova alternativa terapêutica no cenário clínico para prevenir as infecções bacterianas ocasionadas por biofilmes.
Palavras-chave: biofilme bacteriano, bactérias patogênicas, peptídeos antimicrobianos, peptídeos otimizados.

• Lucas Bianchi Nunes

Atualmente, as infecções bacterianas têm sido preocupação de governos e alvo de estudos, pois este é um problema em todo o mundo. As pessoas que mais sofrem são aquelas imunossuprimidas, sendo afetadas por super bactérias como Enterococcus faecalis e Escherichia coli que provocam graves danos à saúde. Com o avanço da tecnologia e a prospecção de novas drogas, os peptídeos antimicrobianos (PAM) são candidatos a combater esses microrganismos e curar pessoas. Visando o melhoramento molecular dos PAMs, a metodologia de Desenho Racional de Peptídeos visa melhorar a atividade antibacteriana dessas moléculas e reduzindo efeitos adversos ao paciente. Os Butylatus são o resultado do desenho racional da toxina TsAP-1, do escorpião Tytius serrulatus. Em relação aos resultados in silico, os peptídeos Butylatus apresentaram características de peptídeos antimicrobianos, baixa energia de interação nas membranas miméticas, boa estabilidade estrutural na membrana. Além disso, a atividade in vitro observada foi que os peptídeos apresentam atividade antimicrobiana e baixa atividade hemolítica. A partir desses resultados, é possível considerar os peptídeos Butylatus como candidatos a produtos biotecnológicos de interesse para a indústria farmacêutica e hospitalar.
Palavras-chave: Bactérias patogênicas; Desenho racional; Peptídeos antimicrobianos; Estudo in silico.

• Paula Alessandra da Silva

• Octavio Luiz Franco

As Infecções intestinais causadas por Salmonellas têm sido uma preocupação em inúmeras partes do mundo, podendo ocorrer a partir do consumo de alimentos e/ou água contaminados com bactérias patogênicas. Em contrapartida, o uso de antibióticos tem sido preconizado para o tratamento tanto em humanos como em animais, que por muito tempo foi usado de forma irresponsável, possibilitando bactérias se tornar resistentes a múltiplos fármacos. Uma possibilidade eficaz tem sido a busca de peptídeos antimicrobianos para ao tratamento. Estes peptídeos apresentam mecanismo de ação amplo, podendo ser uma alternativa inclusive para prevenir a formação de biofilmes que podem estar associados aos surtos de contaminação alimentar. Desta forma, o objetivo deste trabalho consistiu em analisar oito peptídeos contra três estirpes de Salmonella enterides, proveniente de isolados de alimentos, responsáveis por surtos humanos. Os peptídeos usados neste estudo foram elaborados com base em desenho racional de peptídeos antimicrobianos (PAMs), levando em consideração, suas estruturas físico-químicas, hidrofobicidade e estruturação em hélice. Diante disso, o experimento pôde mostrar que os resultados foram de grande valia, visto que os oito peptídeos apresentaram atividade antimicrobiana e também atividade antibiofilme para uma das estirpes de Salmonella. Em suma os peptídeos PcDBS1R3F5 e PaDBS1R3F10 podem agir como antibacteriano promissor podendo contribuir no desenvolvimento de produtos bioativos.

Palavras Chave: Bioensaio, Biofilme bacteriano, Infecção intestinal, Peptídeo
antimicrobiano.

• Silvia Gomes Rodrigues

• Octavio Luiz Franco

A foliculite consiste em uma doença comum que acomete geralmente homens jovens, com especial incidência em afrodescendentes. Esta doença, quando ignorada, pode evoluir para um quadro de foliculite decalvante (FD). A bactéria Staphylococcus aureus, o principal micro-organismo encontrado na FD, pode estar presente nas lesões da maioria dos pacientes acometidos pela doença. Existem diversos tratamentos para FD no couro cabeludo, desde medicamentos tópicos a medicamentos orais. Contudo, a maioria destes medicamentos podem apresentar efeitos colaterais que vão desde ressecamento do couro cabeludo à desidratação da haste do cabelo. Nesse trabalho foi avaliado o potencial de possíveis moléculas farmacológicas, os peptídeos antimicrobianos mastoparanos R5 e MO. Para testar esta hipótese, os mastoparanos R5 e MO foram sintetizados, em seguida foram realizadas suas análises por espectrometria de massa e foram avaliadas as atividades antimicrobianas in vitro e in vivo dos peptídeos contra S. aureus susceptível. Nos ensaios in vitro, o peptídeo R5 apresentou concentração inibitória mínima (CIM) de 16 μg.ml-1 e MO apresentou CIM de 32 μg.ml-1 contra S. aureus. O modelo de ensaio in vivo (dermoabrasão) foi estabelecido utilizando camundongos swiss. Nos ensaios in vivo, MO apresentou atividade inibitória mínima a 32 μg.ml-1 contra S. aureus, enquanto R5 a 16 μg.ml-1 não apresentou uma atividade inibitória significativa. Amostras de sangue e pelo dos animais foram plaqueadas e, após 24 h, foram avaliadas quanto à presença de colônias bacterianas. Apenas o sangue do grupo tratado com salina apresentou colônias de S. aureus, mostrando que nos demais grupos a infecção permaneceu tópica. A contagem de bactérias no pelo dos animais mostrou que apenas o grupo com infecção e sem tratamento apresentou 96% de crescimento de bactérias. Acredita-se que o desenvolvimento de um fármaco que contenha o peptídeo MO poderá combater de forma segura e eficaz a FD.

Palavras-chave: Mastoparano, alopecia, cicatriz.

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• Aline da Rosa Gonçalves

• Susana Elisa Moreno

A sepse consiste em uma síndrome complexa de origem infecciosa ocasionada pela resposta inflamatória sistêmica de origem infecciosa, que pode determinar a disfunção ou falência de um ou mais órgãos, com progressão ao óbito. A sepse severa e o choque séptico estão entre as principais causas de morbidade e mortalidade em pacientes neutropênicos, imunossuprimidos ou pacientes hospitalizados. A resposta inflamatória sistêmica tem sido reconhecida como fator proeminente na mortalidade induzida pela sepse, sendo seu controle associado ao aumento da sobrevida dos pacientes. Até o momento apesar dos grandes investimentos na área, o tratamento tem eficácia reduzida. Desta forma, a investigação de estratégias terapêuticas complementares a antibioticoterapia é imperativa. Nesse contexto o presente trabalho teve por objetivo investigar o efeito da N-acetilcisteina sobre a evolução da sepse polimicrobiana. Para tanto, foi utilizado o modelo de CLP (ligação e perfuração do ceco) para a indução de sepse polimicrobiana em camundongos Swiss (CEUA: 014/2016). Foram avaliados quatro grupos experimentais sendo eles: sepse letal (100% de mortalidade), sepse subletal (60-80% de mortalidade) e os correspondentes grupos tratados com 300mg/kg de NAC. Os animais foram avaliados quanto à taxa de sobrevida, carga bacteriana no foco infeccioso e sistêmico, migração de neutrófilos para o foco infeccioso e pulmões. Nossos resultados demonstram que a NAC foi capaz de aumentar em 20% a sobrevida dos animais submetidos à sepse letal e em 40% dos animais submetidos à sepse subletal. Na avaliação da infecção local e sistêmica os animais tratados com NAC demonstraram redução da carga bacteriana no foco infeccioso, na corrente sanguínea e no pulmão. A NAC também foi capaz de estimular a migração de neutrófilos para cavidade peritoneal de camundongos submetidos à CLP. Entretanto não foram observadas diferenças entre os grupos tratados e não tratados no que concerne a infiltração de neutrófilos no pulmão. Nossos dados nos permitem concluir que a NAC possuiu ação benéfica na sepse de animais induzidos a CLP, tanto na sepse letal como na sepse subletal. Podemos concluir ainda que aumento da taxa de sobrevida dos animais submetidos à CLP parece estar associado ao controle da infecção favorecido pelo adequado recrutamento de neutrófilos para o foco infeccioso, além do controle dos efeitos sistêmicos deletérios decorrentes da disseminação das bactérias e de seus produtos para a circulação, como a presença de bactérias para órgãos distantes ao foco infeccioso.

Palavras chave: ligação e perfuração do ceco, inflamação, migração de neutrófilos

• Karen Garcia Nogueira Oshiro

• Octavio Luiz Franco

Diversos peptídeos vêm sendo avaliados acerca de suas atividades contra microrganismos patogênicos. Dentre estes, os mastoparanos demonstram potencial biotecnológico devido às suas propriedades multifuncionais, incluindo sinalização celular, degranulação de mastócitos, ação hemolítica e atividades antimicrobianas. Mastoparanos-R1 e -R5 foram bioinspirados através do algoritmo Joker e selecionados visando o aumento do potencial antimicrobiano de mastoparano-L e redução das propriedades hemolíticas. Os peptídeos foram sintetizados por F-moc e analisados por MALDI-ToF, revelando íons m/z de 1636,14Da (R1) e 1636,39Da (R5). As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) mostraram que os peptídeos R1 e R5 foram capazes de inibir, em menores concentrações, cepas de E. coli, S. aureus e P. aeruginosa. Além disso, R1 e R5 foram capazes de erradicar os biofilmes pré-formados de P. aeruginosa. Os ensaios de citotoxicidade contra células 3T3-L1 e células HUVEC indicam que o peptídeo mastoparano-L apresenta atividade citotóxica a 12,5 e 50μM (IC50), respectivamente. Nas concentrações máximas (100μM) testadas, não foram observadas atividades citotóxicas para os peptídeos R1 e R5. A avaliação do potencial hemolítico mostrou que a 100μM, mastoparano-L induziu mais de 45% de hemólise, enquanto que R1 e R5 causaram menos de 10%. Análises de dicroísmo circular (DC) revelaram que o peptídeo mastoparano-L mostrou maior conteúdo de hélice em água e tampão em relação a R1 e R5. Em TFE 30%, foi possível observar características de α-hélice para o peptídeo mastoparano-L, e em menor intensidade para R1 e R5. Em SDS (50mM), todos os peptídeos apresentaram bandas bem definidas e intensas com alto conteúdo helicoidal. Simulações de dinâmica molecular foram realizadas durante 100ns a fim de se determinar a trajetória dos peptídeos em condições similares às utilizadas no DC. Foi observado que estas moléculas apresentam instabilidade em ambiente hidrofílico. Em TFE e SDS os peptídeos apresentaram formação de α-hélice. Assim, R1 e R5 foram aqui caracterizados como peptídeos helicoidais ambiente-dependente, possuindo atividades antibacterianas promissoras contra cepas susceptíveis e resistentes, bem como potencial de erradicar biofilmes pré-formados, sem apresentar atividades hemolíticas ou citotóxicas.

Palavras-chave: mastoparano, PAMs, resistência bacteriana, biofísica.

• Karen Garcia Nogueira Oshiro

Diversos peptídeos vêm sendo avaliados acerca de suas atividades contra microrganismos patogênicos. Dentre estes, os mastoparanos demonstram potencial biotecnológico devido às suas propriedades multifuncionais, incluindo sinalização celular, degranulação de mastócitos, ação hemolítica e atividades antimicrobianas. Mastoparanos-R1 e -R5 foram bioinspirados através do algoritmo Joker e selecionados visando o aumento do potencial antimicrobiano de mastoparano-L e redução das propriedades hemolíticas. Os peptídeos foram sintetizados por F-moc e analisados por MALDI-ToF, revelando íons m/z de 1636,14Da (R1) e 1636,39Da (R5). As concentrações inibitórias mínimas (CIMs) mostraram que os peptídeos R1 e R5 foram capazes de inibir, em menores concentrações, cepas de E. coli, S. aureus e P. aeruginosa. Além disso, R1 e R5 foram capazes de erradicar os biofilmes pré-formados de P. aeruginosa. Os ensaios de citotoxicidade contra células 3T3-L1 e células HUVEC indicam que o peptídeo mastoparano-L apresenta atividade citotóxica a 12,5 e 50μM (IC50), respectivamente. Nas concentrações máximas (100μM) testadas, não foram observadas atividades citotóxicas para os peptídeos R1 e R5. A avaliação do potencial hemolítico mostrou que a 100μM, mastoparano-L induziu mais de 45% de hemólise, enquanto que R1 e R5 causaram menos de 10%. Análises de dicroísmo circular (DC) revelaram que o peptídeo mastoparano-L mostrou maior conteúdo de hélice em água e tampão em relação a R1 e R5. Em TFE 30%, foi possível observar características de α-hélice para o peptídeo mastoparano-L, e em menor intensidade para R1 e R5. Em SDS (50mM), todos os peptídeos apresentaram bandas bem definidas e intensas com alto conteúdo helicoidal. Simulações de dinâmica molecular foram realizadas durante 100ns a fim de se determinar a trajetória dos peptídeos em condições similares às utilizadas no DC. Foi observado que estas moléculas apresentam instabilidade em ambiente hidrofílico. Em TFE e SDS os peptídeos apresentaram formação de α-hélice. Assim, R1 e R5 foram aqui caracterizados como peptídeos helicoidais ambiente-dependente, possuindo atividades antibacterianas promissoras contra cepas susceptíveis e resistentes, bem como potencial de erradicar biofilmes pré-formados, sem apresentar atividades hemolíticas ou citotóxicas.
Palavras-chave: mastoparano, PAMs, resistência bacteriana, biofísica.

• Esther Vilas Boas de Carvalho

• Octavio Luiz Franco

A bactéria Klebsiella pneumoniae, em especial as estirpes produtoras da enzima β-lactamase, tem sido responsável por grande parte das infecções nosocomiais, incluindo infecções associadas a biofilmes multirresistentes. Essa enzima pode hidrolisar o anel β-lactâmico presente em antibióticos, conferindo resistência à terapias antimicrobianas de última linha. Deste modo, duas cepas de K. pneumoniae KpC provenientes de casos clínicos de um hospital de Brasília (002210477 e 001450421) foram analisadas quanto ao crescimento de suas células planctônicas e formação de biofilme in vitro, como controle foi utilizada a cepa ATCC 13883, através de testes em placas de 96 poços. Após a padronização das condições ideais de crescimento, foram realizados ensaios de susceptibilidade ao peptídeo Pa-MAP 1.9 e aos antibióticos ciprofloxacino e meropenem. A concentração inibitória mínima (CIM) e concentração inibitória mínima de biofilme (CIMB) para os ensaios com Pa-MAP 1.9 obtidos para as cepas KpC 001450421 e 002210477 32 e 64 μg.mL-1, respectivamente, e para cepa ATCC 13883 foi >64 μg.mL-1 em ambos os ensaios. Para ciprofloxacino, o melhor CIM/CIMB foi de 2 μg.mL-1 para cepa ATCC 13883, e 4 μg.mL-1 para ambas as cepas KpC, enquanto que para meropenem o melhor CIM/CIMB foram obtidos para ATCC 13883 a 32 μg.mL-1. No ensaio de concentração bactericida mínima (MBC) a 32 μg.mL-1 a atividade apresentada por Pa-MAP 1.9 frente as cepas KpC foi bacteriostática, para a cepa ATCC não foi observada atividade. A concentração de 64 μg.mL-1 de Pa-MAP 1.9 frente as cepas ATCC 13883 e KpC 002210477 apresentou atividade bactericida e para a cepa KpC 001450421 foi observada a atividade bacteriostática. Ensaios de sinergismo com meropenem apresentaram efeito indiferente contra a cepa ATCC 13883, enquanto que o tratamento demonstrou efeito antagonista frente a cepas KpC. Portanto é evidenciada a atividade de Pa-MAP 1.9 nos resultados obtidos no trabalho, em especial os resultados de atividade bactericida apresentada frente a estirpe KpC 002210477, o que não foi observado em nenhuma outra cepa. Contudo, apesar da inefetividade da combinação Pa-MAP 1.9 e meropenem, o uso deste peptídeo catiônico frente a K. pneumoniae KpC, foi eficiente no combate a biofilmes. Portanto Pa-MAP 1.9 pode ser considerado uma terapia alternativa no combate e controle de biofilmes.

Palavras-chave: Klebsiella pneumoniae KpC, Peptídeo polialanina, Biofilmes

• Natalí Camposano Calças

• Alinne Pereira de Castro

A microbiota intestinal humana é composta por grande diversidade de microorganismos, contudo a maior quantidade é formada por bactérias que desempenham diferentes funções no hospedeiro. A composição bacteriana pode ser modificada por fatores genéticos, individuais e ambientais, contudo, o hábito dietético exerce um fator crítico na modulação intestinal. Especificamente, os alimentos fontes de ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs), exercem resposta inflamatória no hospedeiro decorrente da interação com as bactérias intestinais. Neste contexto, o óleo de linhaça dourada e o óleo de gergelim, ricos em ômega-3 e ômega-6, quando ingeridos, são metabolizados pelas bactérias intestinais em moléculas bioativas que refletem no estado de saúde/doença do hospedeiro. Por esta razão, este estudo objetivou identificar e comparar a comunidade bacteriana presente na microbiota intestinal de ratos Wistar, que consumiram durante 60 dias diferentes dietas contendo 7% de óleos de origem vegetal, fontes de PUFAs. Para tal, os animais foram distribuídos em quatro grupos, sendo eles: Controle (7% gordura animal), S1 (7% óleo de gergelim), L1 (7% óleo de linhaça dourada) e L1.S1 (7% óleo de gergelim mais óleo de linhaça dourada). Para avaliar a comunidade bacteriana, a extração direta de DNA metagenômico foi realizada a partir de amostras fecais, seguido pela amplificação do gene 16S rDNA por reação em cadeia da polimerase (PCR), e posterior sequenciamento de DNA pela plataforma Illumina HiSeq. Como resultado, o filo Firmicutes apresentou maior abundância relativa em todos os grupos analisados, seguido pelos filos Bacteroidetes, Proteobacteria e Actinobacteria. Em nível de gênero, a abundância relativa de Lactobacillus foi maior no grupo L1.S1, enquanto que, a abundância relativa de Blautia e Ruminococcus foi maior nos grupos controle e L1. Vale a pena ressaltar que, houve redução na abundância relativa de Clostridium nos grupos L1, S1 e L1.S1. Por sua vez, o grupo L1.S1 apresentou comunidade bacteriana com maior similaridade com o grupo S1, quando comparada com os demais grupos analisados. Diante do exposto, as dietas com óleo origem vegetal, fontes de PUFAs, foram capazes de modular a microbiota intestinal, principalmente em nível de gênero. Logo, esta pesquisa pode auxiliar frente a nova perspectiva da microbiota intestinal, como alvo terapêutico para diversas doenças, quando associadas a dietas lipídicas de origem vegetal.

Palavras-chave: Ácidos Graxos Poliinsaturados. Comunidade Bacteriana Intestinal.
Metagenoma.

• Flavia Silva Souto Moreno

• Cristiano Marcelo Espínola Carvalho

Os peptídeos antimicrobianos são encontrados no sistema imune inato de uma variedade de organismos e agora são considerados uma alternativa promissora para as moléculas convencionais usadas contra infecções, algumas das quais demonstraram ter uma atividade antimicrobiana e antitumoral dupla. O mastoparano-L é um peptídeo antimicrobiano α-helicoidal bem caracterizado na literatura, devido às suas propriedades biológicas, o último inclui atividade antitumoral. No presente trabalho, desenhamos seis análogos do mastoparano-L e avaliamos sua atividade antibacteriana e antitumoral. Os análogos foram sintetizados, purificados e as propriedades físico-químicas avaliadas. A atividade antibacteriana foi avaliada em diferentes referências bacterianas e isolados clínicos Gram-negativos e Grampositivos. A atividade antitumoral foi avaliada contra células do tumor ascítico de Ehrlich. Os resultados indicaram que todos os análogos sintetizados obtiveram resultados interessantes, no entanto destacamos masto-A1 e masto-A2, os quais apresentaram atividade antibacteriana em baixas concentrações, enquanto masto-A4 mostrou uma tendência à atividade antitumoral a 12,5 μg.L-1 em 24 horas de
experimentação, os outros análogos apresentaram baixa atividade antibacteriana e antitumoral quando comparados com os análogos citados acima. Esses resultados demonstraram que as substituições em mastoparan-L levaram a diferentes características físico-químicas que alteram a atividade antibacteriana e antitumoral, abrindo novas possibilidades para a exploração do potencial terapêutico dessas moléculas.

Palavras-chave: câncer, desenho racional, infecções bacterianas
multirresistentes, mastoparano-L. peptídeos antimicrobianos.

• Marcos Antonio Ferreira

• Ludovico Migliolo

A resistência bacteriana aos antibióticos é um desafio a saúde pública mundial devido ao número crescente de mortes. Disso decorre a necessidade de desenvolver novas moléculas para o tratamento de doenças. Peptídeos antimicrobianos (PAMs) sintéticos racionalmente desenhados baseados em moléculas nativas possuem potencial terapêutico para combater ou controlar bactérias patogênicas. Este trabalho, portanto, objetiva desenhar racionalente PAMs bioinspirados na familia temporina por meio de estudos de modelagem, docking e dinâmica molecular, visando obter potenciais candidatos a fámacos. Três peptídeos foram desenhados racionalmente com base direta no peptídeo Temporina-Pta, isolado da pele da rã Hylarana picturata, que apresenta carga +3 e 61% de hidrofobicidade. Os análogos foram nomeados Temphylarata-1, Temphylarata-2 eTemphylarata-3 os quais apresentaram hidrofobicidade de 69, 61 e 61%, e caragas +4, +4 e +5, respectivamente. Após a modelagem e validação da estrutura tridimensional teórica, os peptídeos foram submetidos a estudos de docking e simulações de dinâmica molecular (DM) em água e micelas de dodecil sulfato de sódio (SDS). Nos estudos in silico de interação peptídeo-membrana, Temporina-PTa, Temphylarata-1, Temphylarata-2 e Temphylarata-3 mostraram atividade contra membranas de bactérias Gram-negativas interagindo com fosfolipídeos DPPE e DPPG da membrana por meio de pontes de hidrogênio em média 3,1; 3,3; 3,0 e 3,1 Å, respectivamente. Na simulação de DM em água os peptídeos apresentaram, como esperado, N e C-terminal instáveis. No entanto, Temphylarata-2 manteve a conformação helicoidal até os 100 ns de simulação. Em contraste, a simulação com SDS mostrou alta estabilidade dos peptídeos no meio hidrofóbico. Além disso, ao comparar os peptídeos análogos com o controle que apresentou variação de 0,18; 0,15 e 0,14 nm de RMSD, RMSF e Rg respectivamente na simulação no meio hidrofóbico os análogos Temphylarata-1, Temphylarata-2 e Temphylarata-3 aparentemente, apresetam melhorias nas estruturas secundárias apresentando variações no RMSD de 0,1; 0,05 e 0,25 nm, no RMSF de 0,04; 0,05 e 0,2 nm e no Rg de 0,05; 0,05 e 0,05 nm respectivamente. Em suma, de acordo com os estudos in silico os peptídeos análogos deste estudo possuem grandes chances de apresentarem estruturas secundárias α-helicoidais com estabilidade aumentada em ambiente hidrofóbico, o que os tornam excelentes candidatos para o desenvolvimento de produtos biotecnológicos para combater bactérias patogênicas.

Palavras-chave: Resistência bacteriana; Novas moléculas; Docking molecular, Dinâmica molecular.

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• Soraya Chicrala Matos

O buritizeiro (Mauritia flexuosa L.f.) é empregado na construção civil, artesanato, culinária e indústria cosmética. Apresenta floração exuberante quase o ano todo, impregnando o ambiente com seu odor agradável, um indicativo do potencial para a utilização de sua fragrância floral. Contudo, suas flores são ainda subutilizadas e pouco exploradas comercialmente. Este estudo teve como objetivo analisar a composição química e a aceitação sensorial da fragrância da flor masculina do buritizeiro de populações nativas do Cerrado de Mato Grosso do Sul, por julgadores do sexo feminino. Para a análise da composição química, voláteis florais foram captados pela técnica de headspace dinâmico e analisados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Para a realização da análise sensorial uma adaptação da técnica de headspace dinâmico foi empregada, utilizando frasco lavador tipo Dreschel com óleo mineral. A análise sensorial avaliou a intensidade, a aceitação e a aplicação do odor floral da inflorescência masculina do buritizeiro. A análise estatística, a comparação entre os avaliadores da mesma fragrância, em relação à intensidade e aceitação do odor, foi realizada pelo teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo pós-teste de Dunn; os demais resultados foram apresentados na forma de estatística descritiva ou como tabela e gráficos; adotou-se um nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que, na composição química das flores masculinas do buritizeiro, houve a prevalência, entre os alcanos, do tridecano (81,3% a 86,6%) em todas as amostras avaliadas; outros compostos representativos foram identificados entre monoterpenos (α-pineno, β-mirceno, (Z)-β-ocimeno, (E)-β-ocimeno) e sesquiterpenos (9-epi-(E)-cariofileno, biciclogermacreno, pristano, além de um composto de estrutura não identificada). Na análise sensorial do óleo mineral odorizado com a fragrância do buritizeiro (OMB), os julgadores atribuíram escore 1 - “muito fraco”, quanto à intensidade do odor e, escore 3 – “não gostei nem desgostei” quanto à aceitação do odor. Quanto à aplicação do odor do OMB, os julgadores indicaram que: 52% o empregariam em produtos de higiene, limpeza e cosméticos, enquanto 48% não responderam ou não o usariam em qualquer tipo de produto. Pode-se concluir que a técnica de headspace dinâmico foi eficaz para a coleta dos voláteis florais de Mauritia flexuosa, a adaptação da técnica de headspace dinâmico foi adequada para odorizar o OMB e, quanto à aceitação pela população feminina do seu odor, a mesma mostrou-se indiferente.

Palavras-chave: buriti; fragrância; headspace; óleo mineral; voláteis

• Soraya Chicrala Matos

O buritizeiro (Mauritia flexuosa L.f.) é empregado na construção civil, artesanato, culinária e indústria cosmética. Apresenta floração exuberante quase o ano todo, impregnando o ambiente com seu odor agradável, um indicativo do potencial para a utilização de sua fragrância floral. Contudo, suas flores são ainda subutilizadas e pouco exploradas comercialmente. Este estudo teve como objetivo analisar a composição química e a aceitação sensorial da fragrância da flor masculina do buritizeiro de populações nativas do Cerrado de Mato Grosso do Sul, por julgadores do sexo feminino. Para a análise da composição química, voláteis florais foram captados pela técnica de headspace dinâmico e analisados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa (CG-EM). Para a realização da análise sensorial uma adaptação da técnica de headspace dinâmico foi empregada, utilizando frasco lavador tipo Dreschel com óleo mineral. A análise sensorial avaliou a intensidade, a aceitação e a aplicação do odor floral da inflorescência masculina do buritizeiro. A análise estatística, a comparação entre os avaliadores da mesma fragrância, em relação à intensidade e aceitação do odor, foi realizada pelo teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo pós-teste de Dunn; os demais resultados foram apresentados na forma de estatística descritiva ou como tabela e gráficos; adotou-se um nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que, na composição química das flores masculinas do buritizeiro, houve a prevalência, entre os alcanos, do tridecano (81,3% a 86,6%) em todas as amostras avaliadas; outros compostos representativos foram identificados entre monoterpenos (α-pineno, β-mirceno, (Z)-β-ocimeno, (E)-β-ocimeno) e sesquiterpenos (9-epi-(E)-cariofileno, biciclogermacreno, pristano, além de um composto de estrutura não identificada). Na análise sensorial do óleo mineral odorizado com a fragrância do buritizeiro (OMB), os julgadores atribuíram escore 1 - “muito fraco”, quanto à intensidade do odor e, escore 3 – “não gostei nem desgostei” quanto à aceitação do odor. Quanto à aplicação do odor do OMB, os julgadores indicaram que: 52% o empregariam em produtos de higiene, limpeza e cosméticos, enquanto 48% não responderam ou não o usariam em qualquer tipo de produto. Pode-se concluir que a técnica de headspace dinâmico foi eficaz para a coleta dos voláteis florais de Mauritia flexuosa, a adaptação da técnica de headspace dinâmico foi adequada para odorizar o OMB e, quanto à aceitação pela população feminina do seu odor, a mesma mostrou-se indiferente.
Palavras-chave: buriti; fragrância; headspace; óleo mineral; voláteis

• Alanderson Rodrigues da Silva

• Heitor Miraglia Herrera

O impacto resultante da interação entre distintos parasitos em relação à saúde do hospedeiro, bem como ao estabelecimento de infecções subsequentes, constitui uma lacuna no conhecimento das coinfecções naturais. Nesse estudo, observamos o efeito do poliparasitismo por Leishmania spp., Toxoplasma gondii, vírus da imunodeficiência felina e o vírus da leucopenia felina, diagnosticados através de testes sorológicos, em gatos residentes em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, expresso por estudos hematológicos e histopatológicos. Ainda, no presente estudo,
examinamos a histologia do baço e linfonodo destes animais para identificar alterações potencialmente associadas a distúrbios na resposta imune relacionados aos agentes patogênicos citados. As análises das variáveis hematológicas revelaram apenas monocitose nos animais infectados pelo vírus da leucopenia felina. Foi observado uma associação entre a presença do vírus da imunodeficiência felina e Leishmania spp., bem como Platynosomum illiciens e Leishmania spp. Ainda, gatos infectados pelo vírus da leucopenia felina apresentaram esplenomegalia. O parasitismo por P. illiciens esteve associado a hepatopatias e a infecção por T.
gondii. mostrou correlação com dermatopatias. O presente estudo mostrou que o poliparasitismo natural por Leishmania spp., FIV e FeLV em gatos está associada à ruptura da arquitetura esplênica, caracterizada pela desorganização do tecido linfóide normal, substituição de leucócitos por células plasmáticas e eventual atrofia do tecido linfóide. O parasitismo por Platynosomum illiciens causa lesões hepáticas crônicas graves.

Palavra Chaves: Felino, Leishmania spp., Platynosomum spp., Toxoplasma gondii,
Retrovírus.

• Hermenegildo Calças Neto

• Marco Hiroshi Naka

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do treinamento da marcha usando um guincho móvel em suspensão, associado ao uso de duas outras tecnologias (FES-Walkaide e toxina botulínica) na reabilitação de pacientes após Acidente Vascular Isquêmico. A amostra foi composta por 20 indivíduos divididos em três grupos: Grupo I - toxina botulínica (aplicação de toxina botulínica nos músculos espásticos, em membros superiores e inferiores e treinamento com o guincho móvel em suspensão); Grupo II-FES-Walkaide (aplicação de estimulação elétrica na perna espástica para correção do pé equino durante a marcha e treinamento com o guincho móvel em suspensão); Grupo III - controle (sem treinamento com o guincho móvel em suspensão). Para avaliar as variáveis clínicas, foram realizadas análises incluindo o tempo de lesão e a idade (em meses) e a aplicação do MEEM (Mini Exame do Estado Mental). Aqueles que alcançaram 21 pontos ou mais no MEEM foram incluídos. O teste de caminhada de 6 minutos foi utilizado para avaliar a capacidade funcional dos indivíduos. Para analisar destes dados, foi utilizadas ANOVA de uma e duas vias de medidas repetitivas, respectivamente. Para as variáveis clínicas, observou-se que não houve mudanças significativas entre os grupos, o que mostra que era uma amostra homogênea. Para a variável funcional, observou-se uma melhora no grupo quando o momento (fator tempo) é considerado. Então, é observada uma melhora da capacidade de caminhar devido à prática do treinamento. Este resultado é muito importante, uma vez que é considerada uma população que sofre com sequelas após acidente vascular encefálico. Portanto, este treinamento pode ser uma base para referência terapêutica.

Palavras chave: Acidente Vascular Encefálico, Toxina Botulínica, FES, Marcha e Reabilitação.

• Viviane Pereira Marques dos Santos

• Octavio Luiz Franco

Klebsiella pneumoniae produtora de K. pneumoniae carbapenemase (Kp-KpC) é uma bactéria resistente a múltiplos antibióticos, incluindo carbapenenemos, antibióticos de última geração. Portanto, combater biofilmes formados por Kp-Kpc pode ser considerado um desafiado. Aqui, avaliamos o potencial antibiofilme do peptídeo catiônico bioinspirado em uma proteína proveniente de Plasmodium chabaudii (MNAINFTCTVHKKVAISV), denominado PCDAMP-5 (IKLLCRVHKK), sintetizado por cromatografia de fase sólida, contra KpC-Kp. O PCDAMP-5 na concentração 64 μg.mL-1 impediu em 91 % a formação do biofilme durante 24h de incubação. Por outro lado, o PCDAMP-5 foi incapaz de erradicar biofilmes préformados crescidos por 6 h. Ensaios de combinação entre PCDAMP-5 e antibióticos (imipenem, meropenem, ciprofloxacino) foram ineficientes em impedir ou erradicar biofilmes de KpC-Kp. Adicionalmente, PCDAMP-5 não apresentou atividade lítica contra eritrócitos humanos e de camundongos na concentração de 640 μg.mL-1. Ademais, realizamos estudos estruturais teóricos com base na sequência primária de PCDAMP-5, onde 100 modelos tridimensionais foram construídos. Dentre estes, foi observado que o modelo de menor energia livre adotou conformação em random coil, sendo posteriormente validado e submetido a simulações de dinâmica molecular. Assim, foi possível avaliar a alta instabilidade estrutural deste peptídeo em ambiente hidrofílico, fato este que pode estar relacionado com diversos estágios de transição possivelmente relacionados a suas funções perante biofilmes. A atividade seletiva do PCDAMP-5 contra biofilmes e a incapacidade de causar
hemólise em eritrócitos murinho poderia fazer deste peptídeo uma alternativa potencial e segura para prevenir infecções causadas por biofilmes bacterianos no cenário clínico.

Palavras-chave: Peptídeos antimicrobianos, Biofilmes, carbapenemases, K.
pneumoniae, biofísica computacional.

• Gislaine Greice de Oliveira Silvia

• Susana Elisa Moreno

Pacientes com câncer apresentam maior predisposição a infecções bacterianas, o que tem contribuído para o aumento da mortalidade e morbidade. Desta forma modelos experimentais representativos da associação de tumores a infecções são essenciais para caracterização dessas patologias, assim como para avaliação de potenciais tratamentos farmacológicos. Nesse trabalho objetivamos padronizar um modelo de tumor ascítico de Ehrlich (TAE) associado à infecção sistêmica por Escherichia coli. Inicialmente avaliamos separadamente a evolução do TAE pela cinética de crescimento tumoral (volume, peso, números de células TAE e leucócitos) e a infecção sistêmica pela curva de sobrevida por E. coli em camundongos Balb-C. A partir desses resultados foram definidas 1x107 células do TAE e 3x106 UFC de E. coli para indução da co-infecção. Ao final de sete dias da inoculação do tumor os animais receberam E. coli para avaliação da sobrevida por 7 dias. Os demais animais que receberam o TAE associado à infecção apresentaram diminuição na taxa de sobrevida comparada aos grupos controles (Salina e E. coli; TAE e Salina; Salina e Salina). Posteriormente, animais com o TAE e infectados com E. coli foram avaliados após seis horas da infecção quanto a resposta inflamatória local, cinética de crescimento tumoral, número de bactérias no exsudato, sangue e pulmões, infiltração neutrofílica nos pulmões e avaliação da permeabilidade vascular. Foi possível observar que os animais submetidos à co-inoculação de TAE
e E. coli não apresentaram diferenças na progressão do tumor. Entretanto observouse um aumento no número de neutrófilos na cavidade peritoneal e nos pulmões, indicando uma exacerbação da resposta inflamatória local e sistêmica. Os resultados demostraram que o TAE é capaz de aumentar a permeabilidade vascular, que é exacerbada pela infecção com E. coli. Sugere-se que aumento de permeabilidade em vasos do peritônio possa favorecer o acesso de bactérias à corrente sanguínea, desencadeando uma resposta inflamatória sistêmica, com
consequente infiltração bacteriana e neutrofílica nos pulmões, o que poderia explicar a diminuição da taxa de sobrevida em camundongos que foram inoculados com TAE e E. coli. Nossos dados sugerem que o modelo proposto é capaz simular os eventos fisiopatológicos que acometem pacientes com câncer em quadro de infecção sistêmica além de possibilitar estudos farmacológicos para elucidação de novas drogas multifuncionais com atividade imunomoduladora, antibacteriana e com atividade antitumoral. Também nos fornece um modelo para caracterização dos mecanismos envolvidos na união o tumor e infecção, além da possibilidade de análise de outas bactérias frente ao TAE para avaliação de mecanismos ou fármacos específicos para diferentes tipos de bactérias.

Palavras chave: câncer, tumor de Ehrlich, infecção, Escherichia coli, modelo
murino.

• Jhessyca Leal Melgarejo

• Octavio Luiz Franco

Klebsiella pneumoniae, pertencente ao grupo "ESKAPE", consiste em uma bactéria normalmente associada à infecção hospitalar e resistência a antibióticos. Em um dos os mecanismo de resistência, o anel dos antibióticos β-lactâmicos pode ser clivado e, posteriormente, inativado pelas enzimas β-lactamases, incluindo a Nova Déli metalo-β-lactamase. Esta enzima é produto da expressão do gene plasmidial blaNDM-1, que proporciona uma rápida disseminação da resistência. O gene de resistência blaNDM-1 tem sido relatado em todo o mundo, sendo o Brasil o maior reservatório da América Latina. Aqui, objetivamos detectar e caracterizar o gene de resistência blaNDM-1 de vinte e quatro isolados de K. pneumoniae, entre 2013 e 2014, envolvidos
em casos clínicos de diferentes hospitais, da região Centro-oeste do Brasil. Foram realizados testes de susceptibilidade aos antimicrobianos carbapenêmicos e todos os isolados apresentaram-se resistentes. Os isolados foram microbiologicamente e molecularmente identificados como K. pneumoniae. A tipagem molecular dos isolados foi realizada por BOX-PCR, apresentando sete grupos clonais entre os isolados de K. pneumoniae, sugerindo disseminação inter ou intra-hospitalar. A detecção do gene blaNDM-1 em isolados de K. pneumoniae foi realizada por PCR.
Todos os vinte e quatro isolados de K. pneumoniae foram detectados com gene blaNDM-1. Além disso, o gene completo de blaNDM-1 foi clonado para obtenção da sequência de aminoácidos da enzima NDM-1 e, subsequentemente, a realização da análise estrutural de NDM-1. A estrutura de NDM-1 obtida nesse estudo foi considerada idêntica a outras estruturas de NDM-1, não apresentando nenhuma variação estrutural. Em síntese, os isolados de K. pneumoniae produtores de NDM-1, apresentam clones, e identidade molecular e estrutural entre os isolados de diferentes hospitais.

Palavras-chave: Bactéria multirresistente, detecção de microrganismo, infecção
hospitalar, Nova Déli Metallo-β-Lactamase.

• Laura Stahl

• Alinne Pereira de Castro

As complicações gastrointestinais associadas à terapia nutricional enteral são representadas principalmente pelo acometimento de diarreia e constipação. Em ambiente hospitalar a dieta enteral, em geral, é apontada como causa de tais complicações, contudo a etiologia é multifatorial, envolvendo mecanismos fisiopatológicos, medicamentosos, clínicos e nutricionais. Existem evidencias científicas indicando estratégias nutricionais diante de diarreia e constipação,
entretanto a melhor forma de utilização, na pratica clínica, ainda não está completamente elucidada. Recomenda-se a definição de padrões e redução da variabilidade de condutas entre profissionais membros da equipe assistencial. Diante do exposto, padronizar o manejo nutricional para diarreia e constipação, se faz necessário, em paralelo com a investigação da relação destas complicações com o uso exclusivo de nutrição enteral industrializada. Neste intuito, esse estudo
observacional foi conduzido na Santa Casa de Campo Grande (MS), durante o período de fevereiro a novembro de 2016. Primeiramente foi desenvolvido o fluxograma de direcionamento das condutas para casos de diarreia e constipação. Em seguida foram observados, diariamente, pacientes alimentando-se exclusivamente com dieta enteral industrializada, durante 14 dias, analisando fatores como idade, gênero, estado nutricional, medicamentos, fórmula de nutrição enteral em curso e ainda a resposta à aplicação dos fluxogramas elaborados. Dos 46 pacientes
analisados, observou-se diarreia em 56%, constipação intestinal em 24% e em apenas 20% houve ausência de diarreia e constipação intestinal. Identificou-se maior frequência de diarreia na faixa etária > 80 anos (80%), no gênero feminino (79%) e na desnutrição (60%). Foi observada relação significativa entre antibióticos e antidepressivos com maior ocorrência de diarreia e de antiparkinsonianos e bloqueadores dos canais de cálcio com maior ocorrência de constipação. Houve melhora em 75% dos episódios de diarreia com aplicação das condutas do respectivo
fluxograma e em 54% dos episódios de constipação. Os resultados obtidos apontam maior frequência de diarreia, nesta população, indicando que idosos, mulheres e desnutridos, sob nutrição enteral exclusiva, estão mais susceptíveis a apresentar diarreia e que o risco de constipação pode ser independente das variáveis investigadas. Sugerem, além disso, que a aplicação dos fluxogramas de diarreia e constipação contribuem positivamente para regulação do trânsito intestinal.

Palavras-chave: Constipação, diarreia, nutrição enteral.

• Marcelo Bastos de Rezende

• Carina Elisei de Oliveira

A ordem Chiroptera vem ganhando destaque. Pesquisas atuais tem apontado os morcegos como possíveis reservatórios, para que essa relação seja esclarecida é preciso elucidar o verdadeiro papel dos morcegos no ciclo epidemiológico das espécies, entre elas Leishmania. Nesse sentido, é necessário demonstrar a viabilidade do parasita na interação parasita-hospedeiro, uma vez que morcegos servem como fonte de alimentação para Lutzomyia longipalpis o principal vetor de
Leishmania spp. A capacidade de dispersão dos morcegos e sua longevidade poderiam facilitar a disseminação e persistência de diversos parasitas, assim como Leishmania spp. A fim de tentar esclarecer o papel morcegos como potenciais hospedeiros de Leishmania spp. objetivamos identificar e isolar Leishmania spp. de amostras de sangue, pele, baço e fígado de quatro espécies de morcegos da família Phyllostomidae (Artibeus lituratus, Artibeus planirostris, Carollia perspicillata e Glossophaga sorcina) em fragmentos florestais da cidade de Campo Grande/MS.
Foram coletados 86 animais, dos quais 13,9% (12/86) foram positivos para kDNA e região ITS de Leishmania spp. Todas as 86 amostras de sangue, pele, baço e fígado inoculado In vitro foram negativas para Leishmania spp., assim como as analises de imprint de baço e fígado e esfregaço sanguíneo. Nossos resultados mostram que os morcegos de áreas urbanas podem ser potenciais reservatórios, porem outras técnicas precisam ser empregadas para demostrar a viabilidade e o ciclo de vida do parasita neste possível hospedeiro.

Palavras Chaves: Chiroptera, morcegos, PCR, Leishmania spp.

• Odair José Ferreira

• Alinne Pereira de Castro

Os surubins do gênero Pseudoplatystoma são peixes migratórios de grande porte, elevado valor comercial e amplamente distribuído pela América do Sul. No Brasil, os surubins Pseudoplatystoma corruscans (pintado) e P. reticulatum (cachara), são muito apreciados pela qualidade de sua carne e também para pesca esportiva, sendo esses fatores responsáveis pela diminuição dos estoques naturais desses surubins. No entanto, para suprir o mercado consumidor e esportivo, híbridos dessas duas espécies, são amplamente cultivados pela piscicultura brasileira. Mas, durante o processo de criação dos alevinos híbridos, os piscicultores encontram alguns entraves, incluindo infecções bacterianas. Por outro lado, a comunidade bacteriana intestinal em peixes apresenta várias funções no hospedeiro, incluindo resistência a doenças e imunidade. Nesse sentido, a caracterização da comunidade microbiana intestinal em alevinos híbridos poderá fornecer uma compreensão taxonômica e funcional dessa comunidade. Para uma análise efetiva da diversidade microbiana, uma das etapas mais importantes é o isolamento de DNA metagenômico. Portanto, a utilização de um protocolo de extração de DNA eficaz no quesito de rendimento e pureza faz-se necessário. Nesse contexto, o presente estudo objetivou a padronização de protocolo para extração de DNA metagenômico da comunidade microbiana associada ao intestino médio de alevinos híbridos P. corruscans x P. reticulatum. Diante do exposto, foram utilizadas três réplicas biológicas para extração de DNA metagenômico, as quais obtiveram 78 ng/μL, 106 ng/μL e 67,8 ng/μL respectivamente. A reação em cadeia da polimerase das amostras comprovou a presença do gene 16S rDNA, assim evidenciando a presença de DNA metagenômico bacteriano obtida a partir do protocolo otimizado. Os resultados obtidos demonstraram que o protocolo padronizado foi eficaz na extração de DNA metagenômico da comunidade microbiana associada ao intestino médio de alevinos híbridos P. corruscans x P. reticulatum.

Palavras-chave: Diversidade bacteriana intestinal, DNA metagenômico, protocolo de extração de DNA.

• Guilherme Augusto Abrantes Sousa

• Ludovico Migliolo

Mato Grosso do Sul se destaca no cenário nacional por sua produção agrícola, principalmente de milho. Essas altas taxas de produção estão relacionadas ao melhoramento genético de cultivares, correções de solo e ao manejo integrado de pragas. Dentre os principais insetos-praga que atacam a cultura do milho, destaca-se a lagarta Spodoptera frugiperda. Os métodos de controle estudados para eliminação desse inseto são diversos, como rotação de culturas, aplicação de inseticidas, expressão heteróloga de toxinas, além dos estudos com inibidores de protease encontrados em plantas. Maranta arundinacea L., popularmente conhecida como araruta, é uma planta originária da América do Sul. A araruta tem como principal fonte comercial o amido, que fica armazenado em seus rizomas. Nos órgãos de armazenamento proteínas de defesa, como os inibidores enzimáticos, são importantes na invasão por patógenos. Os inibidores de proteainase interagem com enzimas formando complexos que bloqueiam a atividade catalítica. De acordo com isto, o objetivo deste trabalho foi isolar e avaliar a fração rica de M. arundinacea L. com atividade in vitro frente a proteinases serínicas de Spodoptera frugiperda. Para a extração de proteínas totais de M. arundinacea L, rizomas frescos foram maceradas em processador com a adição de tampão Tris-HCl 50 mM pH 7,5 na proporção de 1:10 (m:v) e após agitação suave overnight a 130 rpm, a amostra foi centrifugada a 10000 rpm durante 10 min a 4 °C, o sobrenadante foi denominado extrato bruto (EB) e precipitado com (NH4)2SO4 (F0-30; F30-60 e F60-100). A quantificação foi realizado pelo método de Bradford. O EB, as frações e a fração rica em inibidores foram analisadas em gel de poliacrilamida SDS-PAGE 12% e corados com Coomassie Blue. Além disso, todas as amostras foram avaliadas in vitro quanto a atividade inibitória frente a tripsina utilizando como substrato BApNA 1,25 mM. A fração F2 foi monitorada para identificação da massa molecular por SDS-PAGE e espectrometria de massa. As massas moleculares encontradas foram correspondente à 25 e 11 kDa em eletroforese, e de 23722,2 e 11734,6 Da para espectrometria de massa. As frações F1 e F3 não apresentaram valores significativos de atividades inibitórias e foram descartadas. A atividade antitríptica para EB, F2 e FR foram de 100% nas concentrações de 1,5, 0,75 e 0,65 μg.mL-1 para BApNA. Para o ensaio de termoestabilidade, a FR apresentou 100% de atividade em todas as variações de temperatura, e taxa de hemólise nos ensaios utilizando eritrócitos menor que 7% para todas as concentrações utilizadas, e IC50 de 0,3 μg.mL-1. A FR apresentou porcentagem de inibição de 100% nos ensaios com o homogenato intestinal de S. frugiperda, na concentração de 0,025 μg.mL-1 testada. De acordo com os resultados obtidos a FR é um interessante produto da araruta com potencial biotecnológico no controle e manejo integrado de pragas inibindo serino proteinase em baixas concentrações.

Palavras-chave: Inibidores, Enzimas, Sítio Catalítico, Mecanismo de Inibição, Controle

• BRENO EMANUEL FARIAS FRIHLING

• Ludovico Migliolo

Os animais peçonhentos apresentam toxinas com alta concentração de proteínas e peptídeos biologicamente ativos. São misturas que apresentam uma alta concentração de proteínas, representando aproximadamente 90% do peso seco do veneno, sendo responsáveis pelos efeitos em 25% dos acidentes ofídicos. Dentre os compostos presentes no veneno das arraias e serpentes, podemos destacar as fosfolipases A2, que são um grupo importante de proteínas com capacidade de hidrolisar fosfolipídios de membranas. Devido a isso vários efeitos são atribuídos à esse grupo de moléculas como atividade antiviral, antifúngica, antibacteriana, antitumoral. O objetivo desse trabalho foi caracterizar a partir de métodos bioquímicos clássicos, moléculas bioativas presente no ferrão de Potamotrygon falkneri e da peçonha de Bothrops moojeni. As arraias foram coletadas no rio Canindé, município de Nioaque; já a toxina das serpentes foram obtidas pelo Biotério da UCDB. O perfil proteico e cromatográfico da toxina de P. falkneri foram obtidos por SDS-PAGE e cromatografia líquida de fase reversa. Após essa análise inicial, foi possível observar a presença de 7 bandas proteicas, via SDS-PAGE e, 4 frações obtidas por cromatografia líquida de alta performance. O isolamento da fosfolipase do veneno de B. moojeni foi realizado por meio de três passos cromatográficos, envolvendo cromatografia de exclusão molecular (Sephacryl S-100) seguido de cromatografias de fase reversa (C-18). Após o primeiro passo cromatográfico, as frações coletadas foram avaliadas por espectometria de massas e, foi realizado atividades enzimáticas e antibacterianas. Com o primeiro passo cromatográfico, foi coletado 5 frações (FI, FII, FIII, FIV e FV), na FIII foi encontrado um íon, via MALDI-ToF, que corresponde às massas moleculares de fosfolipases. Por esse motivo, essa foi a fração aplicada na cromatografia de fase reversa, onde foi obtido 4 frações. A massa molecular, sugerida por SDS-PAGE, mostrou bandas de aproximadamente 15 kDa, posteriormente confirmada por MALDI-ToF. Todas as etapas foram monitoradas por atividades enzimáticas e, após a obtenção da fração desejada, as atividades antibacteriana e antibiofilme foram verificadas contra S. aureus. As atividades enzimáticas foram de 100%, quando comparado à atividade do controle. Além disso, após as análises realizadas com S. aureus, foi possível observar uma atividade inibitória de crescimento planctônico nas duas maiores concentrações testadas (1024 e 512 μg.mL-1). Em decorrência dessa atividade, a possível fosfolipase encontrada no veneno de B. moojeni pode tornar-se um potencial modelo para elaboração de novos fármacos.

Palavras chave: Bothrops moojeni, Potamotrygon falkneri, Fosfolipase, purificação, perfil cromatográfico.

• Nathalie Nogueira Paré

• Antonia Railda Roel

Metabólitos secundários são compostos produzidos por plantas que desempenham funções de defesa química contra herbívoros, resultado do processo de evolução de alguns grupos vegetais. Estas substâncias podem causar diferentes efeitos aos insetos herbívoros tais como, repelência, deterrência, atraso na maturação do desenvolvimento fisiológico, baixa fertilidade e fecundidade, e morte. Por esta ação química específica algumas plantas são empregadas popularmente como inseticidas, como Simarouba versicolor (Simaroubaceae), espécie nativa do Cerrado. Assim objetivou-se estudar a composição química dos extratos etanólicos das folhas e caules e o seu potencial inseticida no controle de Aedes aegypti (Dip.: Culicidae) e na toxicidade em Artemia salina (Crustacea: Artemiidae). Os estudos sobre classe dos compostos químicos foram feitos por fitoquímica clássica, Cromatografia de Camada Delgada (CCD) e Ultravioleta (UV). A CCD e os espectros de UV confirmam a presenças de compostos fenólicos, flavonoides, triterpenos, cumarinas, esteroides e alcaloides, com teor de fenóis totais superior nos caules (199,1 ± 0,34 mg g-1 ácido gálico) em relação as folhas (78,34 ± 0,08 mg g-1 ácido gálico), com o mesmo perfil ocorreram para os teores de flavonoides. O extato etanolico de folhas causou um alongamento no ciclo biológico do A. aegypti nas concentrações de 1000 e 500 μg mL-1 em relação a testemunha, enquanto que o de caule, na concentração de 1000 μg mL-1, não resultou em adultos formados. Quanto a toxicidade frente à A. salina, os valores atribuídos a concentração letal (CL50) da população foi em 0,11 e 0,141 mg mL-1 para os extratos do caule e da folha, respectivamente. Conclui-se que o extrato etanólico do caule de S. versicolor tem ação inseticida para A. aegypti nas concentrações de 1000 e 500 μg mL-1 e moderada toxicidade para A. salina o que indica que esta planta possuiu potencial para uso com fitoinseticida.

Palavras-chave: toxicidade, controle de vetores, inseticida botânico, substâncias secundárias de plantas.

• Alessandro Silva da Rosa

• Marco Hiroshi Naka

O objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de um protótipo para resfriar tecidos moles de segmentos humanos até às temperaturas terapêuticas, que estariam na faixa de 10 – 14°C. Essas temperaturas podem melhorar todo o quadro clínico das lesões incidentes sobre os segmentos corporais humanos e auxiliar o processo fisiológico de reparo dos mesmos. Tradicionalmente, as técnicas que compreendem o resfriamento de partes lesionadas do corpo humano são conhecidas como crioterapia. Estas técnicas são geralmente simples e podem ser resumidas pelo uso de uma bolsa de gelo e água gelada. Assim, o protótipo proposto tem a característica principal de ser portátil e sem uso de gelo e água, o que se torna mais fácil de usar. Além disso, um sistema de controle que permite definir a temperatura de resfriamento e o intervalo de tempo para a aplicação de resfriamento é uma característica marcante do dispositivo proposto neste trabalho. O protótipo é um dispositivo tecnológico e terapêutico que utiliza os efeitos físicos de Peltier/Seebeck por meio de placas termoelétricas (placas de Peltier) que podem ser carregadas por uma bateria portátil e recarregável. Assim, este protótipo pode proporcionar a mesma eficiência das técnicas tradicionais de crioterapia com a vantagem de ser portátil e não ter necessidade de gelo e água gelada, por exemplo.

• Marina Arruda de Almeida

• Ludovico Migliolo

O crescente aumento de resistência aos antibióticos disponíveis no mercado de saúde é um problema em nível mundial. O uso de extratos, frações e óleos de plantas da medicina tradicional, representa uma fonte de pesquisa frequente por instituições de ensino e pesquisa nacionais e internacionais, por representarem possíveis fontes de substâncias, do metabolismo secundário, com atividades antimicrobianas frente a organismos prejudiciais à saúde humana. Esse estudo teve como objetivo avaliar o potencial biotecnológico a partir da atividade antimicrobiana do extrato e frações de Baccharis dracunculifolia DC. O material foi submetido à triagem fitoquímica qualitativa por meio de testes colorimétricos; quantificado o teor de fenóis e flavonóides totais e perfil químico por cromatografia em camada delgada (CCD). Os resultados obtidos demonstram que o extrato etanólico bruto de B. dracunculifolia é rico em compostos fenólicos e derivados (flavonóides e antraquinonas). Em menor quantidade foram encontrados taninos, glicosídeos cardiotônicos e açúcares redutores, bem como esteroides. As frações de diclorometano e acetato de etila seguiram o mesmo perfil. As frações de n-butanol e hidrometanólica apresentaram 5 classes de metabólitos secundários seguidos da fração hexânica com 4 classes. Tais constituintes podem apresentar considerável potencial biotecnológico especialmente os relacionados com o controle de microrganismos resistentes aos antibióticos. A atividade antimicrobiana foi confirmada para o extrato e frações contra cepa de Staphylococcus aureus, que serviram como base para formulações de enxaguatórios bucais na concentração de 62,5 e 20,000 μg/mL, onde o extrato e fração hidrometanólica foram eficientes na atividade batericida. O óleo, produto da extração etanólica, que também apresentou atividade inibitória inclusive para o enxaguatório, teve o potencial bactericida avaliado na formulação de pomada, porém não manteve a atividade atividade nas concentrações testadas. Dentre os extratos e frações testados a fração hidrometanólica das folhas de B. dracunculifolia apresentou atividade apenas na maior concentraçao, no entanto por sua solubilidade em água e atividade antibacteriana é a melhor candidata para o desenvolvimento de formulações como enxagatório bucal e geis dentais no controle de patógenos a base de fitoterápico. E a atividade encontrada deve estar relacionado aos composto fenólicos conhecidos por serem bactericidas naturais.

• LUCIANE PEREZ DA COSTA

• Cristiano Marcelo Espínola Carvalho

As demandas crescentes dos serviços de saúde têm sido provocadas pelo aumento das doenças e dependências funcionais dos pacientes com doenças crônicas, acarretando na ocupação prolongada de leitos hospitalares por pacientes crônicos. O projeto Cuidados Continuados Integrados (CCI) se constitui numa das possibilidades para o sistema de saúde brasileiro, com o objetivo de proporcionar respostas adequadas às pessoas com dependência, possibilitando apoio às famílias, promovendo, recuperando e mantendo o conforto e qualidade de vida, prevenindo, reabilitando, readaptando e reintegrando o paciente a sociedade. Desta forma o objetivo desta pesquisa foi conhecer e compreender a atuação e percepção da equipe multidisciplinar no desenvolvimento das etapas dos atendimentos realizados na Unidade de Cuidados Continuado Integrados. A pesquisa foi de caráter quantitativo, descritivo e transversal, a partir do trabalho de campo de uma Unidade localizada no Hospital São Julião, no município de Campo Grande, no estado de Mato Grosso do Sul. O estudo foi estruturado através da coleta de dados restrospectivos dos prontuários do período de outubro de 2013 a outubro de 2014, foram analisados 88 prontuários. Além da aplicação do questionário estruturado aos colaboradores da unidade, participaram da pesquisa 28 pessoas entre eles residentes. Quanto à parte ética este trabalho foi submetido ao CEP da Universidade Católica Dom Bosco n◦ do parecer 1 0001.328, data da relatoria: 26.03.2015. Foi possível com a pesquisa detectar o perfil dos pacientes encaminhados aos leitos de retaguarda. Observou-se predominância da faixa de 60 a 79 anos em 38,8% (n=31), sexo masculino em 52,5% (n=42) da amostra, pacientes com necessidade de reabilitação neurofuncional em 97,5% (n=78), pós Acidente Vascular Encefálico, sendo a Hipertensão Arterial Sistêmica o diagnóstico secundário. Quanto aos testes e escalas aplicadas, observou-se evoluções clínicas após o atendimento da equipe multidisciplinar. Foram obtidas melhoras significativas as quanto à realização das atividades de vida diárias, diminuição do risco social e depressão, melhora da cognição e fragilidade e melhora do estado nutricional. Porém quanto à sobrecarga do cuidador não foram obtidas melhoras significativas durante o tempo de internação.Foi possível compreender as experiências dos integrantes da equipe multidisciplinar, que é composta por integrantes de até 28 anos de idade. Resultados satisfatórios foram observados quanto: à sinalização dos pacientes, elaboração dos relatórios de pré-alta, agilidade da equipe responsável
pela autorização dos leitos, orientações de normas e rotinas, apresentação da unidade, cumprimento dos prazos, envolvimento da equipe e discussões de PTS. Apresentaram-se insatisfeitos quanto: às discussões da pré-alta, os critérios de referenciação e grande fragilidade quanto os acompanhamentos na UBS, PSF, ESF e atendimentos no interior do estado. Conclui-se que o trabalho em equipe mostrouse muito satisfatório, organizado, articulado, com ações e saberes de diversas categorias profissionais. Os resultados foram expressivos quanto à atenção integral às necessidades de saúde e recuperação dos pacientes. Desta forma a compreensão das experiências dos integrantes da equipe multidisciplinar de Cuidado Continuado Integrados é de fundamental importância. Por se tratar de uma experiência única e repleta de significados.

• Camila Fontoura Acosta Ribeiro

• Alinne Pereira de Castro

A gastrectomia consiste em um tratamento cirúrgico para o câncer gástrico, uma doença multifatorial crônica que causa inúmeras mortes em todo o mundo. Como consequência da cirurgia, a absorção de minerais é diminuída, principalmente de ferro. Contudo, estudos sugerem que a suplementação de polidextrose é capaz de modular a microbiota intestinal demonstrando um papel importante no processo de absorção de ferro após gastrectomia. Diante do exposto, este estudo teve como objetivo descrever e comparar a variabilidade da comunidade bacteriana intestinal de ratos gastrectomizados em relação ao efeito da suplementação de polidextrose a 7,5% após 21 dias. Ao total, foram coletadas amostras fecais de 15 animais distribuídos nos grupos experimentais: G1: Animais gastrectomizados alimentados com ração AIN – 93M com adição de polidextrose a 7,5%, G2: Animais gastrectomizados alimentados com ração AIN – 93M sem adição de polidextrose, G3: Animais sham alimentados com ração AIN – 93M com adição de polidextrose a 7,5%, G4: Animais sham alimentados com ração AIN – 93M sem adição de polidextrose, G5: Animais não operados alimentados com ração AIN – 93M sem adição de polidextrose. Nesse contexto, através da análise do gene 16S rDNA, um total de 21 milhões de sequências de alta qualidade foram obtidas para avaliar a diversidade bacteriana intestinal. As análises comparativas revelaram que a suplementação com polidextrose 7,5% auxiliou no aumento da abundância relativa de bactérias com potencial benéfico ao hospedeiro, principalmente bactérias produtoras de ácidos graxos de cadeia curta. Além disso, a suplementação também diminuiu a abundância relativa de bactérias com potencial patogênico como Clostridium. Neste estudo, foi possível observar que os grupos suplementados com polidextrose demonstraram categorias de potencial funcional associado a hemoglobina, transporte de complexo de ferro, vitamina B12 e de ácidos graxos de cadeia curta. Estes resultados, vem contribuir para responder perguntas sobre como a suplementação de polidextrose influencia a microbiota intestinal após gastrectomia. Em resumo, esta é a primeira análise da diversidade bacteriana intestinal de ratos gastrectomizados após a suplementação de polidextrose.

• Beatriz Torres Meneguetti

• Octavio Luiz Franco

Microrganismos patog nicos tm sido respons veis pela maioria das infeccoes intestinais, nosocomiais e por altos Indices de mortalidade devido a resistencia microbiana   adquirida   aos   medicamentos   convencionais.   Dentre   novas alternativas  de  tratamento  contra  esses  microrganismos,  destacam-se  os peptfdeos  antimicrobianos  (PAMs)  que  podem  ser  isolados  de  plantas, mamfferos,  anffbios,  microrganismos  e  insetos.  0 objetivo  deste  estudo consistiu em isolar peptfdeos antimicrobianos a partir de polpa e semente de jenipapo (Genipa  americana  L.)  e avaliar sua acao contra bacterias Gram­ positivas (Staphylococcus  aureus  e Enterococcus  faecalis)  e Gram-negativas (Escherichia  coli). lnicialmente observou-se que dentre as amostras do extrato bruto de polpa e semente de jenipapo, apenas a polpa apresentou bioatividade. A  amostra  de  polpa  foi  entao  submetida  a  cromatografia  em  coluna  de poliamida e de  analise em SOS-  PAGE  a  12%,  onde observou-se bandas proteicas de 12, 16 e 30 kDa. Para a determinacao da massa molecular, foi realizado o MALO/-ToF,  onde o fon majoritario observado apresentou massa molecular de 12730,59 Da. Para a obtenoao da amostra isolada, foi realizada a cromatografia de  troca  ionica  e para  analise da  bioatividade  foi realizado posteriormente  o  bioensaio,  onde  a  amostra  da  fracao  retida  apresentou inibioao de 47,6%  contra E. coli, 38,9%  contra S. aureus  e 17,34%  contra E. faecalis. Em seguida a fraoao retida foi aplicada em coluna de fase reversa analftica C4, observando-se uma Cmica fraoao. A fracao majoritaria apresentou massa molecular de 6059,51  Da atraves de analises em MALO/- ToF. Diante disso,   o   presente  trabalho   aponta   a   descoberta   do   primeiro   agente antimicrobiano proteaceo extrafdo de polpa de jenipapo. Este composto pode posteriormente ser utilizado como uma ferramenta biotecnol6gica capaz de atuar no controle de bacterias patogenicas causadoras de
infeccoes intestinais.

• Célia de Fátima Menegati

• Susana Elisa Moreno

Achyrocline alata (Asteraceae) tem sido utilizada na medicina tradicional devido aos seus efeitos protetores contra a úlcera gástrica e doenças inflamatórias. Estudos prévios com base em análises fitoquímicas de extratos naturais demonstraram a presença de flavonas, flavonóides, ácidos clorogénicos e caféico e outros compostos com propriedades farmacológicas. Objetivos: O presente estudo foi realizado para determinar as atividades anti-ulcerosas, analgésicas e antinociceptiva do extrato de A. alata em camundongos Swiss. Métodos: A. alata flores foram colhidas em Juti / MS, secos à temperatura ambiente, utilizando apenas as flores da planta, realizouse a extração com hexano (HE) por processo de maceração, após a extração, concentrou-se e secou-se ao ar. O extrato de A. alata (1 ug, 5 ug e 10 ug, gavagem) foram utilizados para verificar as atividades do extrato vegetal em gastroproteção. O método utilizado foi o modelo indometacina-úlcera (30 mg/kg, VO) e as lesões da parede gástrica foi determinada pelo programa de análise de imagem (ImageJ). As mesmas doses de A. alata foram usadas a fim de determinar o efeito nociceptivo no teste de analgesia utilizando o modelo de teste de contorções abdominais induzida por ácido acético, administrou-se o extrato de A. alata (1 ug,5 ug e 10 ug, sc) após 15min ácido acético 0,8% ip, A avaliação das contorções abdominais iniciou-se após
5 minutos, contabilizadas a cada 5 minutos totalizando um total de 30 minutos, Realizou-se também o teste de analgesia através do protocolo da formalina, para reforçar o efeito analgésico da planta, administrou-se as mesmas doses do extrato de A alata e após 15 min formalina 2,5% subplantar como estímulo. Resultados: Os resultados mostraram que os ratos pré-tratados durante 14 dias com a dose de 1 ug, 5 ug e 10 ug do extracto de planta não induzem lesões gástricas em todas as concentrações testadas, semelhantes ao observado no grupo de controle tratado com solução salina. Por outro lado, o pré-tratamento com extracto de A. alata atenuou significativamente a lesão gástrica induzida pela indometacina de um modo dependente da dose, com o efeito máximo com 5 ug (80%) quando comparado com o grupo não tratado. No teste de analgesia o extrato de A.alata não apresentou efeito na dose testada. Conclusão: Estes resultados mostraram que A. alata tem atividade significativa contra os danos gástricos, e o software ImageJ mostrou ser um instrumento valioso para a avaliação das lesões.

O uso de protetores solares é a principal abordagem cosmética para prevenção dos sinais de fotoenvelhecimento e do câncer de pele desencadeados pela radiação ultravioleta (R-UV). O desenvolvimento de produtos mais eficientes, com altos fatores de proteção, menor quantidade de agentes sintéticos, valores de mercado mais acessíveis e com menor potencial irritante tem despertado o interesse de muitos pesquisadores. A incorporação de extratos vegetais ricos em compostos fenólicos a formulações fotoprotetoras tem sido estudada pelo complexo de substâncias antioxidantes que esses compostos fornecem à pele e por sua capacidade de absorção da R-UV. Esse estudo teve como objetivo realizar uma avaliação preliminar do extrato etanólico de folhas e galhos de Campomanesia adamantium com vistas às suas atividades antioxidante e fotoprotetora. Foram preparados extratos etanólicos de amostras de folhas e galhos de C. adamantium coletadas na reserva particular da Universidade Católica Dom Bosco (UCDB) no mês de abril de 2014 no município de Campo Grande – MS. O material foi submetido a uma triagem fitoquímica qualitativa por meio de testes colorimétricos; teor de fenóis e flavonóides totais; determinação do pH e da condutividade elétrica; cromatografia em camada delgada (CCD); atividade antioxidante por DPPH; verificação da absorção no R-UV; cálculo do fator de proteção solar (FPS); teste de inibição da enzima tirosinase e avaliação do teor de toxicidade pelo ensaio com Artemia salina. Após a análise dos dados deste estudo foi possível concluir que os extratos etanólicos das folhas e galhos de C. adamantium estudados apresentam compostos fenólicos, sobretudo taninos, cumarinas e flavonóides, havendo uma maior concentração de taninos e flavonóides nos galhos, o que sugere atividade antioxidante e possuem alta absorção nos comprimentos de onda da R-UV indicando atividade fotoprotetora. A atividade antioxidante foi confirmada pelo ensaio com o radical livre DPPH e padrão ácido ascórbico. Os extratos apresentaram valores de proteção solar altos para as folhas (FPS 21) e para os galhos (FPS 23), quando comparados a outras espécies citadas na literatura, podendo ser introduzidos em formulações fotoprotetoras para aumentar o fator de proteção solar. As amostras não demonstraram capacidade de inibição da enzima tirosinase e apresentaram toxicidade frente a A. salina.

A I. paraguariensis, popularmente conhecida como erva mate, é encontrada principalmente na região sul do Brasil. Possui grande papel socioeconômico e ambiental, podendo ser utilizada na indústria de alimentos, medicamentos, cosméticos entre outras. Em sua composição fitoquímica destacam-se os ácidos fenólicos e alcalóides purínicos, flavonóides, saponinas triterpênicas, taninos, minerais e vitaminas. O Objetivo do presente estudo foi avaliar a ação do extrato hexânico da erva mate sobre o processo de neovascularização, em modelo de implante de esponjas de poliéster-poliuretano, em camundongos C57-black6. Esponjas embebidas em 5, 10 e 30% do extrato hexânico da erva mate ou salina (controle negativo) foram implantadas subcutaneamente no dorso dos animais. Após 14 dias as esponjas foram retiradas, sendo conduzida a avaliação da neovascularização por meio da dosagem de hemoglobina e análise histológica para investigação do infiltrado inflamatório e colagênese. Nossos resultados demonstram que as esponjas tratadas com o extrato hexânico de I. paraguariensis nas concentrações de 10 e 30% apresentaram maior quantidade de hemoglobina quando comparado ao grupo controle negativo, indicando o aumento na angiogênese. Por meio da análise histológica observou-se que as concentrações de 10 e 30% do extrato também foram capazes de induzir aumento no infiltrado de células inflamatórias nas esponjas. Do mesmo modo, as mesmas concentrações do extrato da erva-mate foram capazes de estimular a colagênese após o 14º dia de implantação das esponjas. Em conjunto esses dados nos permitem concluir que o extrato da erva mate possui substâncias bioativas capazes de aumentar a neovascularização e a produção de colágeno, sugerindo o potencial uso da erva-mate na cicatrização de feridas cutâneas, bem como em outros eventos onde seja necessário o aumento da neovascularização local.

Campomanesia sessiliflora, nativa do cerrado brasileiro está ameaçada de extinção por causa da exploração econômica extrativista devido ao seu alto valor medicinal e devido à rápida expansão agrícola, o que levou à escolha da espécie para avaliação do potencial biotecnológico. A pesquisa avaliou as atividades biológicas, fotoprotetora e antioxidante de extratos etanólicos da folha e do caule. O extrato etanólico foi submetido a uma triagem fitoquímica, determinação do pH, condutividade elétrica, teor de flavonóides totais, atividade antioxidante, verificação de absorção no UV-A e UV-B e cálculo do fator de proteção solar (FPS), cromatografia em camada delgada (CCD), teste de inibição da enzima tirosinase e avaliação do teor de toxicidade para Artemia salina. Foram encontrados compostos fenólicos, com concentração maior de taninos e flavonóides nos caules em relação à folha. E a presença de flavonóides foi semelhante à atividade de um filtro solar na faixa de UV-A e UV-B. Entretanto, os extratos dos caules demonstraram valores superiores de absorbância entre 300 à 305 nm, sugerindo proteção maior aos raios UV-B. O FPS calculado para os extratos obtidos de folhas e caules foi de 12,3 e 20,0 respectivamente. Em CCD para amostra do caule foram encontrados compostos de interesse fitoquímico, sendo flavonóides (6), compostos fenólicos (5) e terpenos (3). E, em amostra de folhas, foram encontrados flavonóides (4), fenólicos (4), terpenos (5) e alcalóides (4). O ensaio de toxicidade sugere efeito tóxico para folha, mas não para caule. Os extratos testados apresentam atividade antioxidante, absorbância nas faixas de radiações UV-A e UVB, com FPS alto. Por fim, há perspectivas promissoras para exploração de antocianinas, carotenoides e compostos fenólicos, além da capacidade antioxidante para produção de protetores solares naturais.

As análises quantitativas e qualitativas dos polens presentes nos produtos apícolas são realizadas por especialistas da área, através das técnicas de palinologia e melissopalinologia. No entanto, a identificação realizada pelo ser humano é passível de erros devido ao desgaste na tentativa de classificar os polens, além de ser uma atividade morosa que requer muita experiência. Assim, dispor de um programa de computador capaz de realizar a automação da identificação de grãos de pólen torna o processo de identificação polínica mais rápido e preciso. Para comparar o índice de acerto da classificação pela visão
humana com a que utiliza técnicas computacionais, 34 apiculcutores voluntários classificaram 46 imagens de pólen com tempo cronometrado. Os tipos polínicos utilizados foram previamente identificados por especialista. As técnicas computacionais testadas utilizaram os atributos de gradiente (histograma de palavras visuais), cor (RGB e HSV), forma (fator de forma) e textura (Matriz de coocorrência) visando automatizar o reconhecimento de imagens microscópicas de 23 tipos polínicos. Os resultados da extração de atributos foram analisados pelos classificadores KNN, J.48 SMO e C-SVC. Os desempenhos obtidos pelos classificadores foram medidos pelas métricas de porcentagem de classificação correta, medida-F e área sob a curva ROC (Receiver Operating Characteristic). O teste com visão humana classificou corretamente 63.7% das imagens, das quais o pólen de Chromolaena odorata foi o melhor reconhecido. Não foi detectada diferença significativa entre os índices de acerto das técnicas de identificação automática p= 0.1902. Foi possível realizar o reconhecimento automático das imagens dos 23 tipos polínicos analisados com índice de acerto de 64%, desempenho muito próximo ao obtido pelos humanos (63.7%). O pólen com maior índice de acerto com o que utilizou o emprego de todas as técnicas computacionais foi Mimosa somnians. Em relação ao tempo, a identificação das 46 imagens por visão humana levou quase duas horas para ser concluída, enquanto que as técnicas automáticas testadas levaram menos de 10 minutos para classificação de todo o banco com 805 imagens. Assim, comprova-se a eficiência do tempo e da porcentagem correta de classificação realizada de maneira automática em relação à humana.

Maranta arundinacea é uma planta nativa da América do Sul, apresenta potencial econômico como uma matéria prima não convencional para amido, através de seus caules subterrâneos denominados rizomas. Devido à falta de informações sobre o número de espécies, o risco de extinção e o crescente interesse no uso e na comercialização de seu amido fazem da M.arundinacea uma espécie ideal para estudos moleculares. Assim, o objetivo deste trabalho foi a identificação de quatro acessos de M. arundinacea denominados de Comum, (CeTeAgro); SC, Guadalupe e Seta (EMBRAPA-CENERAGEM) através dos genes cloroplastidiais matK e o rbcL, e avaliar a similaridade genética, através de marcadores moleculares RAPD. Para análise de RAPD utilizou-se 25 primers, destes, o primer OPA 02 foi selecionado por apresentar maior número de bandas polimórficas. Através do coeficiente de similaridade de Jaccard, juntamente com o teste de UPGMA, foi possível estabelecer dois grupos distintos, Grupo I (Comum) e Grupo II (SC, Guadalupe e Seta). A identificação dos acessos por meio dos genes cloroplastidiais matK e o rbcL, foram submetidas por busca BLAST (GenBank) e BOLD Systems, resultando em 99,66 a 100% de identidade para o gene matK e rbcL, respectivamente, dos quatro acessos estudados, comparados com M. arudinacea. A construção da árvore filogenética, utilizando o gene rbcL, realizada por Neighbor-Joining, observou-se após a separação do grupo externo, um grande grupo de M. arundinacea contendo os acessos SC, Guadalupe, Seta e o acesso do banco de doados M. arundinacea (3845927560), não apresentado diferenças entre eles. Outro grupo interno foi constituído por Comum e o acesso do banco de dados M. arundinacea (JQ592613.1), evidenciando que o Comum se diferenciou dos demais acessos SC, Guadalupe e Seta, entretanto indicando que todos os acessos são da espécie M. arundinacea.

A seleção de leveduras a partir de frutos do cerrado brasileiro tem sido uma das escolhas para obtenção de produtos a partir de processos fermentativos. Com a bioprospecção, tem-se aumentando o número de espécies descritas, e ainda, as enzimas que estas leveduras produzem. As leveduras possuem características peculiares, tais como especificidade na produção de enzimas, diversidade, capacidade de produção em larga escala e facilidade no seu manuseio. Objetivou-se com o presente trabalho isolar, identificar e avaliar o potencial biotecnológico de leveduras associadas a frutos do Ingá (Inga edulis), Guavira (Campomanesia adamantium) e Pinha (Annona squamosa). As leveduras foram isoladas em meio YEPD sólido, para a obtenção de culturas puras. Os diferentes morfotipos isolados foram caracterizados genotipicamente pela técnica molecular da PCR/RFLP baseado na amplificação da região ITS1-5,8S-ITS2 do DNA ribossomal e digestão com a enzima Hinf I, estas análises resultaram em perfis de bandas correspondentes aos gêneros Saccharomyces, Picchia e Candida, os quais foram confirmados por meio do sequenciamento da região ITS1-5.8rDNA-ITS2, resultando nas espécies Candida citri, Wickerhamomyces (Pichia) ciferrii, W. (Pichia) kudriavzevii, Meyerozyma (Pichia) caribbica e Saccharomyces sp. Foi avaliado o potencial biotecnológico das linhagens, com a produção de enzimas e detecção por métodos colorimétricos através de espectrofotometria. A partir dos nove isolados de leveduras, pôde-se obter a enzima invertase (15,83 ± 0,80UI/mL) produzida por Meyerozyma (Pichia) caribbica. Quanto a enzima pectinase, (2,8 ± 0,03 UI/mL) foi produzida por Meyerozyma (Pichia) caribbica. A enzima β-glicosidase (1,84 ± 0,18) foi produzida pelo isolado Meyerozyma (Pichia) caribbica. Conclui-se portanto que os métodos de identificação foram efetivos, e os métodos para detecção de enzimas mostraram resultados promissores, que visa a continuidade dos estudos em etapas futuras.

A reabilitação visa ao desenvolvimento da independência e integração social, através da melhora das capacidades físicas daqueles que necessitam. Com isso, a reabilitação gera benefícios psicológicos e sociais, bem como o aumento da tolerância e redução da frustração. Uma forma de realizar esse processo de reabilitação é por meio da prática de esportes. A prática de esporte por cadeirantes tem crescido de forma significativa, especialmente em jogos oficiais. Entretanto, pouca informação sobre o efeito de treinos com o uso de equipamentos tem sido encontrado para os cadeirantes, principalmente, em termos de melhoria na eficiência mecânica, torque e técnica, para os cadeirantes. Para este fim, temos como objetivo realizar um estudo do projeto de uma plataforma mecânica para o treinamento de equilíbrio de praticantes de basquetebol de cadeiras de rodas. A plataforma foi baseada na observação de uma técnica de treinamento de equilíbrio em aulas de surfe, realizada em praias do litoral brasileiro. Por fim, o projeto da plataforma e um protocolo de treinamento com a finalidade de avaliar a eficácia do equipamento são apresentados.

A mandioca por apresentar elevados teores energéticos e protéicos tem sido amplamente utilizada na alimentação humana e também de ruminantes. Ainda, possui propriedades anti-neoplásicas e anti-helmínticas. Entretanto, efeitos tóxicos vêm sendo registrados em ruminantes e em animais de experimentação. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos tóxicos da acetona cianidrina, metabólito da linamarina, presente na mandioca, em ratos wistar. Utilizou-se para este estudo seis grupos com cinco animais cada, os quais receberam 25, 50, 75, 100 e 125 μmol de acetona cianidrina em uma única dose oral. O grupo controle recebeu água acidificada pH 3,5. Os animais foram observados durante a administração da acetona cianidrina, e durante as 48 horas subsequentes. A sintomatologia clínica apresentada pelos animais foi observada e registrada. Também foram dosadas enzimas séricas para avaliação das funções renal e hepática. Por ocasião da necropsia, foram colhidas amostras de tecidos para exames histopatológicos. Logo após a administração da acetona cianidrina, alguns animais dos grupos G2 (50 μmol), G4 (100 μmol) e G5 (125 μmol) apresentaram sintomatologia nervosa expressa por convulsão, contração muscular involuntária, andar cambaleante, incapacidade de coordenação motora, prostração e midríase. Todos os animais do G5 e quatro animais do G4 morreram em até sete minutos da administração da acetona cianidrina. Alguns animais, especialmente do G2, se recuperaram da fase aguda permanecendo vivos até o final do experimento. As análises bioquímicas revelaram que houve comprometimento hepático. A histopatologia revelou lesões severas no encéfalo (edema e degeneração) e fígado (degeneração hidrópica e necrose), além de edema pulmonar. Conclui-se com o presente trabalho que no modelo murino a acetona cianidrina, embora apresente efeitos tóxicos hepáticos, pulmonares e no sistema nervoso central, em concentrações de até 25 μmol/kg de peso vivo, os animais sobrevivem à fase aguda.

A soroterapia é o único tratamento reconhecido para envenenamento ofídico. Mesmo quando administrado, o soro não reduz eficazmente os efeitos locais dos venenos. Envenenamento por Bothrops mattogrossensis é caracterizado por reações locais como necrose e inflamação intensa, constituída pela formação de edema e migração leucocitária. Vários extratos de origem vegetal têm combatido eficazmente estes efeitos. Capsicum chinense apresenta compostos comumente atribuídos à inibição do veneno. Foi avaliada a capacidade do extrato hexânico de Capsicum chinense de inibir a formação de edema e migração de neutrófilos induzidas por veneno de Bothrops mattogrossensis. Foi avaliada a influência na migração de neutrófilos das doses de 5, 10 e 15mg/kg do extrato após 6 h e 15mg/kg 12h após a inoculação de 30μg de veneno. Também foi avaliado o efeito de 15mg/kg de extrato sobre a formação de edema de pata nos intervalos de 15, 30, 60, 120 e 240minutos após a inoculação de 30μg de veneno. Apenas a dosagem e 15mg/kg conseguiu reduzir significativamente a migração de neutrófilos com relação ao controle. As dosagens menores não apresentaram diferença com o controle. O extrato não conseguiu reduzir significativamente o edema de pata com relação ao controle positivo em nenhum dos intervalos analisados. Porém a dosagem de 15mg/kg conseguiu reduzir significativamente a migração com relação ao controle positivo para os intervalos de 6 e 12 horas pós inoculação. Portanto estes resultados demonstram que Capsicum chinense possui em sua composição substancias capazes de inibir alguns efeitos do processo inflamatório induzido pelo veneno de Bothrops mattogrossensis.

A soroterapia é o único tratamento reconhecido para envenenamento ofídico. Mesmo quando administrado, o soro não reduz eficazmente os efeitos locais dos venenos. Envenenamento por Bothrops mattogrossensis é caracterizado por reações locais como necrose e inflamação intensa, constituída pela formação de edema e migração leucocitária. Vários extratos de origem vegetal têm combatido eficazmente estes efeitos. Capsicum chinense apresenta compostos comumente atribuídos à inibição do veneno. Foi avaliada a capacidade do extrato hexânico de Capsicum chinense de inibir a formação de edema e migração de neutrófilos induzidas por veneno de Bothrops mattogrossensis. Foi avaliada a influência na migração de neutrófilos das doses de 5, 10 e 15mg/kg do extrato após 6 h e 15mg/kg 12h após a inoculação de 30μg de veneno. Também foi avaliado o efeito de 15mg/kg de extrato sobre a formação de edema de pata nos intervalos de 15, 30, 60, 120 e 240minutos após a inoculação de 30μg de veneno. Apenas a dosagem e 15mg/kg conseguiu reduzir significativamente a migração de neutrófilos com relação ao controle. As dosagens menores não apresentaram diferença com o controle. O extrato não conseguiu reduzir significativamente o edema de pata com relação ao controle positivo em nenhum dos intervalos analisados. Porém a dosagem de 15mg/kg conseguiu reduzir significativamente a migração com relação ao controle positivo para os intervalos de 6 e 12 horas pós inoculação. Portanto estes resultados demonstram que Capsicum chinense possui em sua composição substancias capazes de inibir alguns efeitos do processo inflamatório induzido pelo veneno de Bothrops mattogrossensis.

Larvas e adultos de insetos encontrados em cadáveres fornecem evidências importantes para a estimativa sobre o intervalo pós-morte. Determinar o ínstar de espécimes de insetos imaturos coletados a partir de um cadáver pode ser uma maneira eficiente para analisar os casos de interesse forense, pois os ovos de dipteras são geralmente depositados no cadáver após sua morte. A análise forense de DNA recuperado a partir do intestino das larvas de dipteras pode ser usado para identificar do que estas se alimentaram. Considerando-se que a aplicação da ciência forense para investigação do crime envolve rotineiramente identificação das espécies genéticas com base na similaridade de sequência de DNA. Objetivou-se neste estudo detectar DNA de vertebrados, a partir do conteúdo gastrointestinal de larvas de dípteras necrofágicas, através da utilização de técnicas moleculares, amplificando por PCR o gene da leptina (lep), específico para os vertebrados. Neste estudo foi demonstrado que os dados de sequência do gene lep podem ser obtidos a partir do conteúdo gastrointestinal dissecado de uma larva que se alimentou do tecido dos vertebrados. No entanto, considerando que análise do conteúdo a partir do trato digestório das larvas é uma técnica recente, ainda existem muitas limitações técnicas que não foram exploradas.

A Classe Insecta compreende o maior grupo dos seres vivos conhecidos, representa cerca de 70% das espécies animais, sendo foco de estudos as interações entre os organismos e o meio onde vivem distribuídos nos diversos biomas e determinado por diversos fatores. A Ordem Hymenoptera é um grupo de grande abundância, apresentam uma grande diversidade de padrão de vida, nichos ecológicos e níveis de sociabilidade, mas pouco conhecido em nível de espécie. O Hymenoptera parasitoide são comuns e abundantes em todos os sistemas terrestres e desempenham importante papel na regulação da população de pragas. Dentro os Hymenoptera parasitoides e predadores que são ecologicamente importantes, pois além de serem agentes reguladores de diversos grupos de insetos, servem como indicadores da presença ou ausência destas populações. No plano econômico, o grupo oferece alternativas para o controle de insetos-praga para a agricultura através de inimigos naturais minimizando o uso de agroquímicos. Diante do exposto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a riqueza e abundância de Superfamília de Hymenoptera parasitoide e predadores em diferentes fisionomias do Pantanal, Corumbá, MS. Foram comparadas quatro áreas, mata ciliar, paratudal, espinheiral e canjiqueiral. As coletas foram obtidas de armadilhas do tipo Malaise e os insetos capturados foram recolhidos separadamente e acondicionados em frascos coletores, preservados em álcool 96%, triados manualmente e identificados com auxílio de lupa binocular (estereomicroscópio) ao nível de superfamília. Foram capturados 3497 exemplares de Hymenoptera parasitoides e predadores pertencentes a 10 superfamílias. Na Mata ciliar foram capturados 47 indivíduos, no Paratudal 1964 indivíduos, no Espinheiral 383 indivíduos e no Canjiqueiral 1103 indivíduos pertencentes à época de seca e cheia. Com esses resultados foi possível demonstrar a riqueza e abundância dos Hymenoptera parasitoides e predadores presentes esses ambientes. Os resultados obtidos indicam que houve maior incidência em apenas duas áreas e demonstrou que duas superfamílias foram as mais abundantes, Chalcidoidea e Ichneumonoidea tanto na época da seca e cheia. Os resultados obtidos indicam que ao contrário do que se acredita, o Pantanal apresenta uma alta diversidade de superfamílias de vespas parasitoides e predadores, indicando grande potencial para abrigar espécies raras e consequentemente grandes quantidade de espécies novas para determinar superfamílias de Hymenoptera. Assim, é de fundamental importância a realização de novos levantamentos da entomofauna nessas áreas, onde existe pouca informação sobre a diversidade do Pantanal. Além disso, se faz necessário um estudo mais aprofundado sobre a composição faunística de insetos no Pantanal, utilizando maior número de pontos de coleta para que se tenham dados mais representativos.

O presente estudo analisou fitoquimicamente a presença de composto majoritários do extrato bruto metanólico das flores de Alternanthera paronichioides, bem como sua atividade antioxidante frente ao radical livre DPPH e a solução reagente de fosfomolibdênio. No extrato mostrou-se a presença de compostos fenólicos como: flavonóides, flavonas, flavonóis, flavanonas. Ao estudo da atividade antioxidante, o mesmo mostrou-se possuir capacidade antioxidante. O conteúdo total de flavonóides e de fenóis pode estar relacionado a capacidade antioxidante do extrato. Os resultados indicam que flores de A. parochinioides possui os mesmos constituintes químicos encontrados em partes vegetativas dessa espécie, o que pode justificar sua capacidade antioxidante e o amplo uso de outros exemplares do gênero na medicina popular.

• Simone Palma Favaro

Frente às buscas incessantes por novos patamares de rendimento de óleo com maior adensamento energético de espécies oleaginosas, tem-se perspectivas reais para a utilização da palmeira macaúba (Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd ex Martius). Esta, por sua vez, apresenta vários requisitos para tornar-se uma importante matéria-prima fornecedora de óleos e outras biomassas de interesse comercial. Além de apresentar amplitude de utilizações que não se restringe a uma única cadeia produtiva e adaptabilidade a diversos biomas, possui alta produtividade, podendo alcançando até 5.000 kg de óleo por hectare e seus produtos e coprodutos têm caráter multipropósito. Neste estudo, objetivou-se por meio de metodologia de superfície de resposta, investigar o processo de secagem rotativa de frutos de macaúba em diferentes combinações de tempo e temperatura, avaliando parâmetros de qualidade do óleo de polpa. Os frutos utilizados nos ensaios foram coletados diretamente do cacho em estado de maturação completa, no município de Corumbá/MS, entre os meses de agosto a dezembro de 2012 e mantidos a -20°C até a realização das análises. Como planejamento experimental, realizou-se um Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) 22 completo com onze ensaios, tendo como variáveis independentes o tempo e a temperatura de secagem e como variáveis dependentes, a umidade da casca e polpa e a atividade de água da polpa, bem como, os parâmetros de qualidade do óleo (acidez, índice de peróxidos, absortividade molar a 232 e 270 nm, carotenos totais e perfil de ácidos graxos por cromatografia gasosa). Cada ensaio foi realizado em batelada com 5 kg de frutos previamente descongelados. Após a secagem, os frutos foram despolpados manualmente e a polpa liofilizada para a extração do óleo. A extração foi realizada a frio com éter de petróleo. O solvente foi removido em evaporador rotativo a 45°C. O óleo resultante foi borbulhado em N2 para inertização da amostra, e mantido a -20°C até a realização das análises. As análises foram realizadas em frutos frescos e secos. Além dos parâmetros de qualidade de óleo, foram determinados a umidade na casca e polpa e atividade de água na polpa. Observou-se uma relação direta entre estes dois parâmetros, pois ao diminuir a umidade da polpa por ação da secagem, a atividade de água também foi reduzida. Por outro lado, ao aplicar a Análise de Variância com teste F, fatores não significativos nas respostas de índice de peróxidos, absortividade molar (232 e 270 nm) e quantificação de carotenos totais impossibilitaram a obtenção de um modelo matemático preditivo e formação de superfície de resposta. A qualidade do óleo de polpa de frutos frescos apresentou-se muito boa, com acidez de 3,28% e ausência de peróxidos, inferindo que as operações aplicadas desde a colheita até a extração do óleo foram adequadas. No óleo de polpa de frutos secos, observou-se pouca influência do processo de secagem rotativa nos resultados. A acidez apresentou valores inferiores ao estabelecido para óleos brutos (máximo 5,0%), preconizados pela legislação brasileira. O índice de peróxidos apresentou maior variação nos resultados. Estes mostraram-se inferiores em ensaios onde o tempo e a temperatura foram aplicadas de formas mais drásticas. Entretanto, esta pode ser explicada pela instabilidade e consequente diminuição dos níveis de peróxidos ao longo do processo de oxidação lipídica. A absortividade molar não apresentou consonância com o índice de peróxidos, por outro lado, a formação de compostos primários e secundários de degradação do óleo como resultado do aquecimento pôde ser observada. O teor de carotenos totais presente no óleo de polpa fresca, originalmente de 646,64 ppm, variou muito pouco em função do processo de secagem. Possivelmente, foram detectadas substâncias de pigmentação escura em um mesmo comprimento de onda como resultado da reação de Maillard. As frações majoritárias de ácidos graxos em óleo de polpa fresca foram palmítico (22,91%) e oleico (57,97%). Para todos os parâmetros qualitativos e quantitativos avaliados, observou-se que as variações nos resultados foram mínimas.

• Susana Elisa Moreno

A cicatrização de feridas é um fenômeno complexo no qual estão envolvidos diversos eventos celulares e moleculares. As úlceras cutâneas crônicas são um problema frequente na prática médica, com consequências sociais e alto custo com cuidados médicos. A busca por substâncias terapêuticas capazes de melhorar o processo cicatricial é imperativa. Dadas as propriedades químicas do óleo da polpa da bocaiúva (Acocomiaaculeata), rico e tocoferóis, beta-carotenos e ácidos graxos poli-insaturados, assume-se que esse composto tenha grande aplicação terapêutica, porém, pouco ainda têm-se estudado em relação ao seu papel na cicatrização. O presente estudo objetivou avaliar o efeito do óleo da polpa de bocaiúva (OPB) na evolução da cicatrização de úlceras cutâneas em ratos Wistar. Foram feitas duas excisões cirúrgicas na pele de cada animal com o emprego de um punch histológico, atingindo todas as camadas da pele. Os grupos experimentais consistiram em animais com as úlceras tratadas com a pomada veículo e animais com as úlceras tratadas com a pomada contendo o óleo da polpa da bocaiúva a 20%. Após 2, 7 e 14 dias do procedimento cirúrgico, cinco animais/grupo foram eutanasiados e avaliou‐se a reepitelização por meio do índice de cicatrização das úlceras. Uma biópsia de úlcera/cicatriz de cada animal foi coletada, fixada e corada com hematoxilina/eosina e tricrômio de Masson para quantificação de infiltrado inflamatório, fibroblastos, vasos sanguíneos e colagênese. A biópsia da outra úlcera foi utilizada para a dosagem de mieloperoxidase (MPO), para avaliar o infiltrado neutrofílico no tecido lesado, e dosagem dehidroxiprolina (OHP) para avaliar a colagênese. Os resultados demonstraram que no 2° dia, o OPB foi capaz de induzir o aumento do recrutamento de células inflamatórias para a lesão em relação ao grupo controle,representadas principalmente por neutrófilos. No 7º dia, houve redução das células inflamatórias no grupo tratado com OPB em relação ao 2º dia. Nesse período não foram observadas alterações no grupo controle. No 7º dia, observou‐se importante redução do infiltrado neutrofílico na pele dos animais tratados com OPB, sugerindo que o OPB tenha papel pró-inflamatório inicial, aumentando o recrutamento celular no inicio do processo cicatricial e agindo de forma reguladora posteriormente. A fibroplasia observada na pele dos animais tratados com OPB foi mais intensa em relação ao grupo controle, no 14º dia de avaliação. Por outro lado, a diferença observada na colagênese entre os grupos de tratamento quando avaliada pela determinação da concentração de hidroxiprolina, ocorreu apenas no grupo controle do 7º para 14º dia. Entretanto, a coloração com tricrômio de Masson indicou aumento no conteúdo de colágeno no grupo controle do 2º para o 7º dia. As úlceras do grupo tratado com o OPB apresentaram‐se mais reepitelizadas no 7º dia, quando comparadas ao grupo controle. Assim, os dados permitem sugerir que a pomada contendo o óleo da polpa da bocaiúva estimula de modo favorável a fase inflamatória da cicatrização, acelerando o processo e contribuindo para a melhor qualidade da cicatriz.

O Brasil tem dedicado esforços no sentido de valorizar os denominados biocombustíveis, um dos quais o biodiesel. A produção anual deste é de 1,2 bilhões de litros e como conseqüência, políticas de incentivo do Governo Federal incentivam a mistura com o diesel derivado do petróleo. Há aumento proporcional de glicerol bruto residual deste processo. Com valor cada vez mais baixo, há potencialidade de que este resíduo venha a ser valorizado por vias biotecnológicas. Para que isto ocorra há necessidade de prospectar microrganismos melhor adaptados ao substrato, sendo possível obter por bioprospecção a partir do próprio glicerol bruto. Para dispor de cepas capazes de metabolizar este, duas vias podem ser utilizadas: assimilação e fermentação. Apenas um morfotipo de levedura foi isolada deste resíduo de biodiesel em meio ágar glicerol 3%. As colônias brancas, opacas, medindo 1 a 2 mm de diâmetro, côncavas e com bordas regulares. Ao microscópio revelou células de formato oval e elípticas, com presença de brotamentos. O morfotipo foi denominado LEV. Além das características morfológicas foi avaliado o crescimento em meio sólido e líquido, juntamente com sessenta e seis (66) leveduras do banco de leveduras RECOL, utilizando glicerol comercial PA como única fonte de carbono em concentração de 3%, para selecionar os possíveis agentes assimiladores/fermentadores. Os experimentos foram realizados sob aerobiose a 30°C, em 120 horas de incubação. Os meios utilizados foram: ágar glicerol 3% e tubos de ensaio contendo meio líquido basal com 2% de glicerol PA com um tubo de Durham invertido para captar os gases produzidos. Ambos foram avaliados a cada 24 h para verificação dos resultados. Comparando-se as duas técnicas, destacou-se que para a metodologia do ágar glicerol 3%, as linhagens RECOL1 e RECOL13 não formaram precipitado, enquanto para os testes em tubos, não houve crescimento nas linhagens L32, L34, LB e RECOL1. Assim, os resultados são apenas coincidentes para a levedura RECOL13. Os primeiros tubos de Durham em que se observou formação de gás foram: RECOL41 e RECOL42, após 24 h da incubação. Os resultados também mostraram que a cepa isolada LEV apresentou habilidade de produzir precipitado e gás em até 120 horas. Em razão destes resultados foram utilizadas técnicas de biologia molecular e a amplificação dos fragmentos de DNA em aproximadamente 500 pb juntamente com a purificação e sequenciamento do material isolado, utilizando a ferramenta BLAST (GenBank) permitiu a identificação segura em termos de gênero e espécie mostrando o isolado ser Pichia kudriavzevii.

• Marco Hiroshi Naka

O estado de Mato Grosso do Sul tem se destacado no cenário nacional na cadeia do agronegócio, sendo que o setor sucroenergético no estado tem contribuído para o desenvolvimento do mesmo, atraindo investimentos, desenvolvimento e gerando empregos. Várias etapas de produção são necessárias para a formação de um produto final. A cadeia envolvida na produção de etanol é
extensa e exige várias etapas importantes e complexas para processamento e obtenção do etanol. O objetivo da presente pesquisa foi analisar e avaliar as etapas de produção de etanol em usinas sucroenergéticas instaladas no sul do estado de Mato Grosso do Sul, visando identificar as mesmas, bem como os processos envolvidos na produção de etanol. A coleta de dados foi realizada através do levantamento de informações das entidades representativas do setor sucroenergético e através de questionários com perguntas objetivas e subjetivas enviadas on-line e “in loco”. A análise dos dados se deu de forma qualitativa e os mesmos revelaram que, para o preparo da matéria prima, a água é captada de rio; a cana é desfibrinada e o caldo é extraído por moenda ou difusor; o processo de moagem da cana varia entre as usinas pesquisadas e o tratamento do caldo é através de processos físicos-químicos. As linhagens mais utilizadas no processo: foram: Catanduva-1 (CAT-1), Pedra-2 (PE-2), Barra Grande 1 (BG) e Reg Instan (RI). Em relação ao mosto, o mesmo apresentou 18 º Brix, com variação de temperatura entre 30 ºC a 35 ºC e pH entre 4,5 a 2,6. O tempo de fermentação variou de 8 a 10 horas e o antibiótico mais utilizado é monensina. Os insumos mais utilizados foram os antiespumantes, desinfectantes e bactericidas de uso diário. Os contaminantes mais frequentes que foram relatados foram as bactérias do grupo (Gram+) e houve variação entre o índice de contaminação entre as usinas analisadas, sendo que o ácido sulfúrico é utilizado para o tratamento do fermento, como forma de diminuir a contaminação nas dornas. As usinas pesquisadas produzem etanol anidro e hidratado obtidos através do ciclo hexano e peneira molecular. Os dados levantados nesta pesquisa são importantes para analisar, avaliar e conhecer as mais variadas etapas de produção de etanol, que possa viabilizar um alto potencial de produção e proporcionando ao Mato Grosso do Sul, uma garantia futura de produção sustentável de energia limpa.

As áreas de pastagens no Brasil são formadas por diversas forrageiras, utilizadas como alimentação animal. Devido à necessidade de conhecer o fluxo gênico no gênero Brachiaria, foi elaborado este projeto com os seguintes objetivos específicos: estabelecer um ensaio para avaliação de fluxo gênico em Brachiaria; determinar um método de extração de DNA de Brachiaria em larga escala usando moinho vibratório e aperfeiçoar o protocolo de extração de DNA foliar; testar em gel de poliacrilamida marcadores moleculares do tipo microssatélites de Brachiaria brizantha para serem usados em testes de paternidade de progênies de Brachiaria ruziziensis; acompanhar o florescimento e a polinização a campo e recolher sementes nos genótipos receptores de Brachiaria ruziziensis; germinar as sementes coletadas e obter plantas resultantes da polinização a campo; comparar os resultados obtidos da eletroforese em gel de poliacrilamida com os resultados da eletroforese capilar em sequenciador automático. Foi usado um delineamento concêntrico para a implantação do experimento usando no centro B. brizantha cv. Marandu como fonte doadora de grão de pólen e cinco genótipos de B. ruziziensis receptores de pólen (R30, R38, R44, R46 e R47) randomizados em 16 raios cardeais com distâncias de 1 a 50 metros. 24 microssatélites de B. brizantha foram analisados através de eletroforese em gel de poliacrilamida nos parentais utilizados neste experimento de fluxo gênico. A época de florescimento foi acompanhada para o planejamento da colheita das sementes. Amostras das sementes coletadas foram tratadas com ácido sulfúrico para superação da dormência e colocadas para germinar. Das plântulas (progênies) obtidas foram extraídos os DNAs por meio do método CTAB adaptado para o uso de placas de 96 poços em moinho vibratório. PCRs usando os 10 locos previamente selecionados foram feitas novamente nos parentais do fluxo gênico por meio de eletroforese capilar no sequenciador. Dentre os cinco genótipos de B. ruziziensis, o R44 foi o que apresentou o maior período de sobreposição de florescimento com a cv. Marandu. Da coleta de sementes foram obtidas 31.879 sementes cheias de 138 plantas do genótipo R44 de Brachiaria ruziziensis. Das sementes tratadas com ácido sulfúrico, submetidas à germinação foram obtidas 1437 progênies. Os DNAs obtidos das progênies foram armazenados a -20ºC para futuras análises de fluxo gênico. Dos locos de B. brizantha testados em gel de poliacrilamida, cinco locos microssatélites não amplificaram nos genótipos de B. ruziziensis e entre os restantes 19 locos, quatro foram monomórficos ao comparar cultivar Marandu e todos os genótipos receptores. 10 locos foram considerados capazes de discriminar híbridos entre essas duas espécies de Brachiaria. Em uma próxima avaliação de fluxo gênico nestas espécies de Brachiaria é recomendado utilizar apenas o genótipo R44 como receptor de grão de pólen, devido o maior período de sobreposição de florescimento com a cultivar Marandu. A adaptação do método de extração de DNA usando placas de 96 poços em moinho vibratório foi eficiente revelando um potencial para extrair DNA genômico em larga escala, de boa qualidade, com maior rapidez e rendimento. Durante a genotipagem dos dados do sequenciador, para algumas amostras foram verificadas diferenças no número de alelos quando comparadas com os resultados da seleção dos microssatélites em géis de poliacrilamida.

Na busca de alternativas de controle do mosquito Aedes aegypti que minimizem os impactos ambientais e preserve a saúde humana, os extratos botânicos são aliados importantes como inseticidas. Neste trabalho procurou-se avaliar a composição fitoquímica e o efeito antioxidante da planta Spermacoce latifolia e sua atividade inseticida sobre larvas de A. aegypti. As partes aéreas da planta foram coletadas na região de Campo Grande - MS, após secagem e trituração foram submetidas à extração com metanol e submetido à análise fitoquímica via úmida por meio de
reações de precipitação e ou mudança de cor e análise em CCD Foram determinados compostos fenólicos (Método: Folin-Ciocalteu's), flavonoides totais (Método: AlCl3) e atividade antioxidante (Método: DPPH). Os resultados fitoquímicos indicaram a presença de compostos fenólicos; flavonoides; taninos, esteroides e triterpenos livres, cumarinas e alcaloides. O conteúdo de fenóis totais e flavonoides foi 482,7±1,8 mgGA/g e 165,4±1,5 mgQE/g respectivamente e a maior porcentagem de atividade antioxidante foi 150 μg/mL. Para o bioensaio foram utilizadas 25 larvas
de terceiro estádio nas concentrações de 1,0g.L-1; 0,5g.L-1; 0,25g.L-1 e 0,1g.L-1 dos extratos brutos, em quatro réplicas. Foi definida como toxidade a paralisação ou inatividade total das larvas. Conclui-se que a concentração 0,62g.L-1 indica potencialidade larvicida contra A. aegypti. O extrato metanólico mostrou-se promissor para a obtenção de metabólitos secundários com atividade larvicida e esta atividade pode estar ligada aos compostos fenólicos e flavonoides.

• Cristiano Marcelo Espínola Carvalho
• Luís Carlos Vínhas Ítavo (M/D) (Orientador(a))

Objetivou-se avaliar o valor nutricional e quantificar os aspectos de anti-qualidade e suas correlações com a qualidade de gramíneas exóticas do gênero Brachiaria. Foram colhidas amostras de folhas verdes de exemplares de Brachiaria spp. provenientes de canteiros experimentais pertencentes à coleção de Braquiárias da EMBRAPA Gado de Corte, Campo Grande, MS, no período matutino, a cada 30 dias em 12 canteiros sendo quatro repetições por gramínea, medindo 3m x 3m. Foram avaliadas as gramíneas Brachiaria. humidicola cv. comum, Brachiaria humidicola cv. BRS Tupi, Brachiaria decumbens cv. Basilisk D62, Brachiaria decumbens cv. D70, Brachiaria ruziziensis ecotipo R124 e Brachiaria brizantha cv. BRS Arapoty, Brachiaria brizantha cv. B6, Brachiaria brizantha cv. BRS Xaraés, Brachiaria brizantha cv. BRS Marandu, Brachiaria brizantha cv. BRS Piatã e agrupadas em épocas Verão, Outono, Inverno e Primavera. Foram determinadas as analises de composição bromatológica, digestibilidade in vitro, teores de protodioscina e produção cumulativa de gás das folhas das gramíneas material in natura. As B. decumbens D62 e D70 apresentaram maior teor de Protodioscina entre as gramíneas de em todas as épocas com maior valor observado na primavera (3,14 e 2,74%). A B. Humidicola foi a que teve menor concentração de Protodioscina. Todas as gramíneas apresentaram ter o composto anti-nutricional em sua composição. Para produção cumulativa de gás a B. ruziziensis cv. R124 teve maior produção onde na primavera produziu 16,44 mL/gás. O teor de Prodotioscina demonstra correlação negativa para DIVMS, fração C e a fração A+D, demonstrou efeito sobre a qualidade das gramíneas. A Protodioscina composto anti-nutricional demonstrou efeito sobre a digestibilidade das gramíneas.

• Simone Palma Favaro

No Brasil, o óleo de soja refinado é o mais consumido para fins alimentícios em razão da alta disponibilidade e baixo custo. Sua composição em ácidos graxos predominantemente insaturados favorece as reações de oxidação. As garrafas de polietileno tereftalato (PET) transparentes, que são as embalagens majoritárias utilizadas para óleos vegetais, podem também favorecer a fotoxidação. O objetivo deste trabalho foi avaliar as características de qualidade do óleo de soja refinado em garrafa de polietileno tereftalato (PET), sob diferentes condições de armazenamento. Óleos de soja de três fabricantes (A, B e C) embalados em polietileno tereftalato (PET), produzidas por diferentes indústrias, foram mantidos sob exposição à luz (700 lux) e no escuro por seis meses. A qualidade foi monitorada através da determinação dos seguintes parâmetros: índice de acidez, umidade, índice de peróxido, ponto de fumaça, absortividade molar a 232 nm e 268 nm, clorofila, impurezas insolúveis em éter de petróleo, sabões, aspecto a 25 °C, odor e sabor durante 6 meses, com frequência mensal de análises em todos os lotes. A passagem de luz através da embalagem PET contribuiu para a formação de compostos oriundos de processos de oxidação. Verificou-se aumento da acidez em todos os óleos, independentemente da condição de armazenamento. A análise sensorial indicou que a partir do terceiro mês de armazenamento todas as amostras apresentaram qualidade insatisfatória. Os óleos de soja avaliados não mantiveram, durante o prazo de validade, os padrões de qualidade determinados pela legislação brasileira.

• Simone Palma Favaro

O óleo da polpa dos frutos de macaúba (Acrocomia aculeata (Jacq) Lood. ex Mart.), palmeira com potencial para alta produção de óleos em diversos biomas da América Tropical, caracteriza-se por elevada concentração de ácido oleico e carotenoides. Para atender requisitos legais e mercadológicos para óleos vegetais comestíveis e contribuir para o estabelecimento de padrões legais, este trabalho objetiva obter óleo de polpa de macaúba refinado em escala de laboratório e avaliar a estabilidade durante processo de aquecimento. Frutos secos de macaúba a ±80 °C por 7 h foram despolpados mecanicamente e o óleo bruto obtido por prensagem em prensa expeller foi submetido sequencialmente às etapas de refino: degomagem, neutralização, branqueamento e desodorização. Em cada passo do refino o óleo foi avaliado quanto a índice de acidez, índice de peróxidos, absortividade molar a 232 e 270 nm, umidade, índice de refração, índice de saponificação, matéria insaponificável e análise de cor. A estabilidade frente ao aquecimento foi avaliada submetendo-se o óleo bruto e refinado a 180 ºC por 4,5 h com amostragens em intervalos de 30 min. A qualidade do óleo aquecido foi avaliada por parâmetros químicos (acidez, peróxidos, absortividade molar a 232 e 270 nm, compostos polares totais, perfil de ácidos graxos e estabilidade oxidativa) e físicos (propriedades térmicas por Termogravimetria e Calorimetria Exploratória Diferencial). A qualidade inicial do óleo de polpa apresentou-se muito boa com acidez de 1,06% e ausência de peróxidos, indicando que as operações aplicadas desde a colheita até a extração do óleo foram adequadas. O processo de refino empregado para o óleo bruto da polpa de macaúba foi eficiente, gerando produto final com características de identidade e qualidade exigidas pela legislação brasileira para óleos refinados, com exceção da acidez. As frações majoritárias de ácidos graxos do óleo bruto e refinado foram oleico com 59,7% e 61,1% e o palmítico com 22,0 e 20,5% respectivamente. O conteúdo de gordura sólida foi determinado no óleo bruto e refinado nas temperaturas de 10, 20, 25, 30, 35 e 40 ºC. Ocorreu processo oxidativo no aquecimento do óleo indicado pelo aumento das absortividades molares a 232 e 270 nm, índice de peróxidos e compostos polares. No entanto, os limites legais vigentes não foram ultrapassados no intervalo de tempo avaliado. A acidez do óleo bruto e refinado permaneceu abaixo do limite máximo estabelecido para óleos de fritura durante o tempo investigado. O teor de carotenoides totais no óleo da polpa de macaúba bruto, originalmente de 378,09 μg/g, decresceu drasticamente nos primeiros 30 min de aquecimento, não sendo mais detectado após uma 1,0 h. No óleo refinado a concentração inicial de carotenoides era de apenas 9,36 μg/g, desaparecendo completamente após 30 min. As análises térmicas indicaram alta estabilidade oxidativa para o óleo bruto e refinado da polpa de macaúba, mostrando-se similar ao azeite de oliva e superior ao óleo de soja e girassol. Esta propriedade permite sua aplicação em processos de frituras, além de garantir maior estabilidade durante o processo de armazenamento. O óleo da polpa de macaúba atende a demanda de óleos com características nutricionais e industriais desejáveis.

A seleção de leveduras para produção de etanol combustível tem sido feita de leveduras selvagens isoladas em usinas do Estado de São Paulo, principal produtor brasileiro. O número de usinas e destilarias instaladas no Mato Grosso do Sul aumentou muito na ultima década, mas não foram selecionadas leveduras apropriadas para suas condições climáticas. A seleção de leveduras de frutos do Cerrado naturalmente fermentadas poderá propiciar agentes mais adaptados às condições locais. Em razão da sua disponibilidade ao longo do ano em Campo Grande, MS, foram selecionados os frutos da lobeira (Solanum lycocarpum),araticum (Annona crassiflora Mart.), guavira (Campomanesia adamantium Camb.), bocaíuva (Acrocomia aculeata (Jacq.), baru (Dipteryx alata Vogel) e inga (Inga alba (Sw.) Willd.). O método de isolamento adotado foi o estresse concomitante de acidez, pressão osmótica, etanol e temperatura. As frutas foram coletadas em seu estado de máxima maturação e maceradas para constituir um extrato. Esse extrato foi inoculado em tubos de ensaio contendo caldo de cana da cultivar RB-867515 previamente esterilizados contendo um tubo de Duhan invertido. As condições de estresse foram pH3,0 por ajuste com ácido sulfúrico H₂SO₄, pressão osmótica ajustada a 20°B com sacarose comercial e alcoólica (8%) V/V. A temperatura de incubação foi de 32, 34, 36, 38 e 40 ºC ± 2 ºC. Apenas as leveduras que resistiram as condições de estresse isoladas e purificadas dos tubos com produção visível de gás. A resistência das leveduras isoladas as condições múltiplas de estresse foi comprovada pela submissão em testes confirmativos de fermentação em caldo de cana nas mesmas condições de estresses usadas no isolamento. Apenas as leveduras resistentes foram semeadas em meio Ágar Batata Dextrose a 30°C por 48 horas e as colônias morfologicamente diferentes foram descritas e submetidas à caracterização molecular. O método de isolamento sob múltiplos estresses proporcionou apenas cinco cepas morfologicamente diferentes, quatro isolados de fruto da lobeira e uma do baru. O isolado (B₃₂) do baru só fermentou a 32 ºC, enquanto que os quatro isolados de lobeira fermentaram nas temperaturas de 32, 34, 36 e 38 ºC. A identificação e caracterização das espécies de leveduras por biologia molecular foi realizada com técnica de reação PCR, e PCR/RFLP. A análise de fragmentos referentes à amplificação da região ITS1-5,8S -ITS2 do DNA ribossomal após digestão com as enzimas Hae III e Hinf I, resultaram em perfil de bandas correspondentes a especie Saccharomyces cerevisiae, o quefoi confirmadocomPCR utilizando SC1d e SC1r, que amplificam as regiões do DNA ribossomal 26S (301pb). O método de isolamento sob múltiplos estresses mostrou-se efetivo para isolamento de Saccharomyces cerevisiae.

• Margareth Bastitote
• Gustavo Graciano Fonseca
• José Roberto Ernandes

• Albert Schiaveto de Souza
• Susana Elisa Moreno
• Jesiel Mamedes Silva
• Luiz Eduardo Roland Tavares

• Luís Carlos Vínhas Ítavo (M/D)
• Simone Palma Favaro
• Alexandre Menezes Dias
• Camila Celeste Brandão Ferreira Ítavo

• Susana Elisa Moreno
• Ana Lucia Alves de Arruda
• Maria Ligia Rodrigues Macedo

• Francilina Araujo Costa
• Maria Isabel Lima Ramos

• Albert Schiaveto de Souza
• Rozanna Marques Muzzi
• Mami Yano

• Rozanna Marques Muzzi
• Geisa Helmold Aspesi
• Cristiano Raminelli

• Susana Elisa Moreno
• Daniele Decanine
• Andrea Barretto Motoyama

• Michael Robin Honer
• Susana Elisa Moreno
• Gisele Braziliano de Andrade

• Francilina Araujo Costa
• Antonia Railda Roel
• Silvio Favero
• Fabricia Zimermann Vilela Torres
• José Raul Valério

• Urgel de Almeida Lima
• Margareth Bastitote

• Daniele Decanine
• Albert Schiaveto de Souza
• Adriane Pires Batiston

• Francilina Araujo Costa
• Gustavo Graciano Fonseca

• Susana Elisa Moreno
• Juliana da Silva

• José Antonio Braga Neto
• Valdir Augusto Neves
• Simone Palma Favaro

• Cleusa Rocha Garcia Gaban

• Eduardo José de Arruda

Aedes aegypti (Diptera: Culicidae), inseto de interesse na Saúde Pública, é um vetor na transmissão de doenças, como Dengue e Febre Amarela. Neste estudo foram analisadas as alterações do sistema digestório de larvas de Aedes aegypti provocadas pelo íon Cu+2 complexado com EDTA através de técnicas histopatológicas. Foram utilizadas larvas no terceiro instar, submetidas a diferentes concentrações de íons complexos pela dissolução de sal sódico de [Cu(EDTA)]-2 no intervalo de 31,25 mg.L-1 a 500 mg.L-1 para cálculos das concentrações letais (CL10, CL50 e CL90) através do programa probitos. Após 24 horas de contato com as soluções as larvas foram submetidas ao processamento histológico e coradas pela técnica de Hematoxilina e Eosina (HE). Os resultados das concentrações letais foram CL10 - 113,89 mg.L-1, CL50 - 232,46 mg.L-1 e CL90 - 474,49 mg.L-1 do íon complexo [Cu(EDTA)]-2. Alterações celulares foram observadas ao longo do sistema digestório pela ingestão dos íons complexos de Cu+2. O mesêntero foi a região mais agredida pelo complexo de Cu+2 quando comparado ao grupo controle. Foram verificadas alterações da borda em escova e aumento dos vacúolos citoplasmáticos nas células dos cecos gástricos e do mesêntero e rompimento das junções celulares a partir do estomodeu. Nas concentrações de 125 mg.L-1, 250 mg.L-1 e 500 mg.L-1, foram observados danos mais extensos. No lúmen do sistema digestório foi possível verificar restos celulares, demonstrando a total destruição celular do tecido. Estes resultados são importantes e complementares para a análise e desenvolvimento de novos ativos larvicidas baseados em complexos metálicos e parte da estratégia de controle persistente do Aedes aegypti nos microambientes de reprodução, considerando a segurança humana e baixo impacto ambiental. Palavras-chave: complexo metálico, larvicida, histopatologia, toxicidade, concentração letal.

• Antonia Railda Roel
• Mami Yano
• Antonio Pancracio de Souza

• Albert Schiaveto de Souza

O objetivo desta pesquisa foi avaliar o efeito da cafeína, um inibidor de receptores de adenosina, na aquisição, retenção e evocação da memória espacial de camundongos, como avaliado no Labirinto Aquático de Morris (LAM) e no Labirinto de Barnes (LB). Para isso, foram utilizados camundongos Suíço, machos, pesando entre 20-30g, subdivididos em seis grupos experimentais para cada protocolo (8 animais em cada grupo). A memória espacial dos animais foi avaliada, no LAM e no LB, durante 5 dias de treino (3 sessões/dia) e também no dia de teste (48 horas após o último dia de treino). A latência, em segundos, para cada animal encontrar a plataforma escondida (LAM) e a casinhola (LB), foi mensurada. Os animais dos três primeiros grupos experimentais receberam, respectivamente, salina, cafeína 3 mg/Kg e cafeína 10 mg/Kg, aplicada, via intraperitoneal, 30 minutos antes cada sessão de treino, tanto no LAM, como no LB. Os três grupos restantes receberam as mesmas drogas, nas mesmas doses, porém, aplicadas imediatamente após cada sessão de treino. No LAM, não houve diferença entre os grupos experimentais, que receberam as drogas no pré-treino, em nenhum dos momentos avaliados (ANOVA, p>0,05). Por outro lado, no pós-treino houve diferença significativa entre os grupos nos três últimos dias de treino e no dia do teste (ANOVA, p variando entre 0,001 a 0,03, Tukey, p<0,05), sendo que a latência dos animais do grupo Cafeína 3 mg/Kg foi significativamente menor do que aquela para os animais do grupo Salina e Cafeína 10 mg/Kg. Na avaliação no LB, houve diferença entre os grupos injetados no pré-treino, nos dois primeiros dias de treino, com a latência do grupo Cafeína 10 mg/Kg significativamente maior do que aquela observada para o grupo Cafeína 3 mg/Kg (ANOVA, dia 1, p=0,049; dia 2; p=0,03, Tukey, p<0,05). Além disso, no dia do teste a latência do grupo Cafeína 10 mg/Kg foi significativamente maior do que aquela observada para os grupos Salina e Cafeína 3 mg/Kg (ANOVA, p=0,01; Tukey, p<0,05). Ainda no LB, entre os animais injetados no pós-treino, a latência do grupo Cafeína 10 mg/Kg, no primeiro dia de treino, foi significativamente maior do que aquela observada para o grupo Salina (ANOVA, p=0,02; Tukey, p<0,05). Nos demais momentos avaliados, não houve diferença entre os grupos experimentais (ANOVA, p>0,05). Este estudo sugere que a cafeína, na dose de 3 mg/Kg, aplicada após o treino, potencializou a aquisição, retenção e evocação da memória espacial, porém, na concentração de 10 mg/Kg, pré-treino, ela interferiu negativamente no processo de aprendizagem. Mais estudos são necessários para confirmarem estes achados. Palavras-chave: cafeína, memória espacial, adenosina, camundongos Suíço

• Luís Carlos Vínhas Ítavo (M/D)
• Simone Palma Favaro
• Geraldo Tadeu dos Santos

• Cláudia Muniz Soares

• Lincoln Carlos Silva de Oliveira

O Brasil apresenta condições favoráveis para o cultivo de vegetais para a produção de biodiesel. O potencial do estado do Mato Grosso do Sul, tanto em produção de etanol, quanto das culturas de soja, girassol, mamona e nabo forrageiro, qualificam as culturas como subsídios disponíveis para indústria petrolífera. Neste trabalho, o processo de transesterificação alcalina dos óleos vegetais, foi feito utilizando como catalisador o hidróxido de potássio. Os protocolos foram padronizados para os óleos de soja e girassol e posteriormente para os demais óleos. Após a obtenção dos ésteres etílicos, as amostras foram submetidas a caracterização química e à análise térmica, avaliando-se os comportamentos das amostras de biodiesel frente a diferentes temperaturas. As reações de transesterificação utilizando os óleos de soja e girassol foram os experimentos com maior porcentagem de rendimento em ésteres etílicos. O éster de girassol caracterizou-se por apresentar maiores picos exotérmicos, nas temperaturas de 354,14 e 435,87 °C. Palavras-chave: etanol, termogravimetria, transesterificação

• Aline Ferreira dos Santos

• Albert Schiaveto de Souza

O objetivo deste estudo foi verificar o efeito do ambiente enriquecido (AE) em camundongos recém-nascidos, de duas diferentes linhagens, na aprendizagem e memória espacial. Neste estudo foram utilizados camundongos Swiss e C-57BL/6. Os animais foram alojados logo após o nascimento em um ambiente controle (AC) ou AE, juntamente com suas respectivas progenitoras, até o desmame (21 dias) e, aos 50 dias de vida, foram submetidos aos testes de memória espacial, o labirinto aquático de Morris (LAM) ou o Labirinto de Barnes (LB). Em ambos os testes mensurou-se a latência para que os animais encontrassem a plataforma escondida (LAM) ou a casinhola (LB). Os dados obtidos sugerem que os animais submetidos ao enriquecimento ambiental, demonstraram um melhor desempenho na tarefa de aprendizagem e memória operacional, em ambas as linhagens de camundongos, quando comparados com o grupo controle no LAM e LB (p variando entre <0,001 e 0,048). Com exceção dos animas da linhagem Swiss, no LAM, a latência diminuiu no decorrer dos dias de treino e no dia de teste (p variando entre <0,001 e 0,006). Este estudo sugere que o efeito do enriquecimento ambiental possa estar associado a um envolvimento direto da região hipocampal na memória espacial em camundongos. Palavras-chave: Ambiente enriquecido, memória espacial, linhagens, camundongos.

• Ana Paula Leão Rossi

• Eduardo José de Arruda

A dengue é doença viral transmitida por mosquitos do gênero Aedes sp. O agente da doença é um Flavivirus com quatro sorotipos conhecidos (DEN1, DEN2, DEN3 e DEN4) que causa a dengue clássica (DC) e a febre hemorrágica da dengue (FHD). Os índices de infestações são preocupantes e estão associados à biologia do inseto e seu comportamento, peculiaridades geográficas, alterações climáticas, as interligações entre regiões e ao aumento da resistência das populações de Aedes aegypti aos inseticidas convencionais. No aspecto epidemiológico, o controle populacional do Aedes aegypti ainda é o método mais eficiente de combate à doença e redução dos impactos da doença com seus picos de ocorrência no verão. No sentido de colaborar com soluções para o problema de saúde pública, bioensaios de toxicidade foram feitos contra larvas de Aedes aegypti e Artemia salina na busca de novos ativos larvicidas a partir do uso de íons metálicos de transição como íons aquocomplexos [Co(H2O)6]+2, [Ni(H2O)6]+2, [Cu(H2O)6]+2, [Fe(H2O)6]+2, [Fe(H2O)]+3 e [Zn(H2O)6]+2, associações e na forma de quelatos metálicos com EDTA. Os resultados de toxicidade permitiram selecionar o quelato [Cu(EDTA)]-2 na forma de ativo livre ou incluso em nano e microcápsulas para a toxicidade dirigida (vetorização) e redução da toxicidade para o homem e ambiente. Avaliou-se a eficiência larvicida dos íons de transição, associações e quelatos para a determinação das doses letais DL10, DL50 e DL90 para larvas de Aedes aegypti e Artemia salina. Os experimentos demonstraram ação tóxica do íon Cu+2 e Fe+3 contra Aedes aegypti e a potencialização pela formação do quelato baseado em EDTA. Palavras-chave: Aedes aegypti, Dengue, metais de transição, quelato metálico, atividade larvicida.

• Ana Cristina Jacobowski

• Eduardo José de Arruda

Aedes aegypti é o vetor de doenças como febre amarela e dengue. A re-emergência do dengue é um dos maiores problemas de saúde pública mundial, de causas complexas, inter-relacionadas e não totalmente compreendidas. A prevenção por redução populacional do mosquito é a estratégia mais eficiente para erradicação da doença. Dados prévios do laboratório com toxicidade e análise morfo-histopatológica demonstram que os íons metálicos de transição possuem toxicidade em relação às larvas e ovos de Aedes aegypti. Estes íons, quando em sistemas nano e microencapsulados poliméricos, têm garantida a vetorização do ativo, a minimização de instabilidades e a manutenção da concentração tóxica no meio de reprodução do inseto. Com o propósito de avaliar e comparar o potencial genotóxico do quelato de cobre livre e encapsulado na forma de nano e microcápsulas, camundongos Swiss e peixes Prochilodus lineatus foram submetidos a diferentes graus de exposição de Na2[Cu(EDTA)] livre e em nano e microcápsulas poliméricas com quitosana por meio do Teste de Micronúcleos e ensaio Cometa in vitro em células VERO. Os órgãos dos peixes (fígado, brânquias e carcaças) foram submetidos à espectrometria de massa atômica para quantificar a fixação do metal nos tecidos. Nas condições experimentais empregadas, os resultados demonstraram que a genotoxicidade do quelato de cobre nos sistemas encapsulados foi muito menor quando comparada ao ativo livre (p<0,001). A concentração de cobre acumulado nos órgãos dos peixes foi maior (p<0,001) que a encontrada na água dos aquários. Entre os órgãos, o fígado foi o que mais acumulou o metal (91,5 mg.Kg-1) na forma microencapsulada. Nas brânquias, o maior acúmulo foi na forma de ativo livre (1,6 mg.Kg-1), assim como nas carcaças (0,82 mg.Kg-1). É possível concluir que os sistemas de encapsulamento são efetivos na liberação controlada do ativo diminuindo também os danos genotóxicos deste composto.

• Ana Paula Maluf Rabacow

• Susana Elisa Moreno

Há mais de 90 anos, os antimoniais são as drogas de escolha para o tratamento da leishmaniose, uma doença que afeta atualmente 12 milhões de pessoas no mundo. Trata-se de uma doença parasitária causada pela picada da fêmea do flebotomíneo infectado. O antimonial pentavalente continua sendo a droga de escolha para o tratamento da leishmaniose cutânea e visceral. Apesar de apresentar problemas relacionados a dosagem e a toxicidade, podendo levar a alterações cardíacas, renais ou hepáticas. Para o teste in vitro, amostras de sangue foram coletadas de cinco doadores saudáveis e após 2, 4, 6 e 24 horas do tratamento das amostras com 5, 15 e 45mg/mL de AM, controles negativo (RPMI) e positivo (MMS), o ensaio cometa foi realizado. Para o teste in vivo, três grupos de seis animais casa receberam doses i.p. de AM (20, 60 and 120mg/kg) diariamente por três dias; o controle negativo recebeu soro glicosado no primeiro dia e o controle positivo recebeu 25mg/kg de ciclofosfamida por dois dias. Após 24 horas da ultima injeção, o sangie e os órgãos foram coletados para a condução do ensaio cometa e teste de micronúcleos. Verificamos que doses do antimoniato de meglumina próximas a dose terapêutica utilizada para tratar a leishmaniose humana foram capazes de induzir dano no material genético de células do coração, baço e medula óssea de camundongo in vivo e células do sangue periférico humano in vitro. Palavras chaves: Antimoniato de meglumina, Ensaio Cometa, Genotoxicidade, Leishmaniose, Teste de Micronúcleos.

• Helder Pereira de Figueiredo

• Susana Elisa Moreno

A formação de bancos de dados regionais, contendo as frequências alélicas da população de uma microrregião, fornece subsídios para aumentar a confiabilidade dos resultados de determinação de vínculo genético. Como se sabe, a fixação de probabilidade de paternidade ou de verossimilhança de um exame de DNA vincula-se a quão frequentes são os alelos encontrados na evidência criminal - ou em uma criança cuja paternidade se pesquisa, em comparação com a população estudada. Assim, ao se aquilatar a frequência da população microrregional expurga-se eventual distorção de dados, bem como argumentos não científicos que buscam minimizar os efeitos jurídicos de uma análise técnica. A frequência alélica de 15 marcadores short tandem repeats (repetições curtas aleatórias) - STR (D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO, D3S1358, TH01, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, VWA, TPOX, D18S51, D5S818, FGA) foi avaliada em uma população classificada como pessoas nascidas no Estado de Mato Grosso do Sul - Brasil, totalizando 274 indivíduos não correlacionados. Para a avaliação das frequências alélicas, amostras de DNA dessas pessoas foram submetidas à amplificação pela PCR (Polimerase Chain Reaction), com o emprego do sistema Identifiler, e os produtos amplificados foram submetidos à corrida eletroforética capilar em analisador genético ABI PRISM 3130. As frequências apuradas foram comparadas com as da população geral brasileira e com as de outros nove estudos realizados com populações do Rio de Janeiro, Mato Grosso do Sul e São Paulo. Os genótipos encontrados na população do Mato Grosso do Sul mostraram-se em Equilíbrio de Hardy-Weinberg e sem diferenças significativas entre as frequências encontradas nas populações de outros estados. Isso indica a irrelevância do vínculo geográfico nos cálculos dos índices de paternidade, o que faculta a utilização de banco de dados regionais ou de banco geral da população brasileira nos estudos de verificação de vínculo genético.

• Albert Schiaveto de Souza
• Mami Yano
• Geisa Helmold Aspesi

• Susana Elisa Moreno
• Denise Fecchio